骨髓瘤细胞悬液的制备方法分析

zui常用的干细胞系为SP2/0和NS-1，均来自BALB/c小鼠骨髓瘤。一般在准备融合前的两周就应开始复苏骨髓瘤细胞，为确保该细胞对HAT的敏感性，每3～6个月应用8-氮杂鸟嘌呤筛选一次，以防止细胞的突变。骨髓瘤细胞悬液的制备方法如下：
1．将刚复苏的瘤细胞培养于含10％胎牛血清的RPMI 1640培养液中，5% C02,37℃温箱孵育。每2～3天换液一次，3～5天传代一次，待细胞生长稳定后方可供细胞融合用。于融合前48～36小时，将骨髓细胞扩大培养（一般按一块96孔板的融合试验需2～3瓶100m1培养瓶培养的细胞进行准备）。
2．融合当天，用弯头滴管将细胞从瓶壁上轻轻吹下，收集于50m1离心管或融合管内。
3. 1000r/min离心5～10分钟，弃去上清液。
4．加入30m1不*培养基，同法离心洗涤一次。然后将细胞重悬浮于lOml不*培养基，混匀。
5．取骨髓瘤细胞悬液在倒置显微镜下观察，生长良好的细胞明亮呈圆形，排列整齐，形态完整，密度适宜(0.1x106～1x106/ml)。经锥虫蓝染色，活干细胞数应大于90%。

人星形胶质细胞微小RNA    英文名称：    HA miRNA    规格:    1 µg
人小脑星形胶质细胞微小RNA    英文名称：    HA-c miRNA    规格:    1 µg
人脊髓星形胶质细胞微小RNA    英文名称：    HA-sp miRNA    规格:    1 µg
人海马趾星形胶质细胞微小RNA    英文名称：    HA-h miRNA    规格:    1 µg
人小胶质细胞微小RNA    英文名称：    HM miRNA    规格:    1 µg
人微血管内皮细胞微小RNA    英文名称：    HDMEC miRNA    规格:    1 µg
人淋巴管内皮细胞微小RNA    英文名称：    HDLEC miRNA    规格:    1 µg
人表皮角质细胞微小RNA    英文名称：    HEK miRNA    规格:    1 µg
人表皮角质细胞-成人微小RNA    英文名称：    HEK-a miRNA    规格:    1 µg
人表皮黑色素细胞-浅色素微小RNA    英文名称：    HEM-l miRNA    规格:    1 µg
人表皮黑色素细胞-中色素微小RNA    英文名称：    HEM-m miRNA    规格:    1 µg
人表皮黑色素细胞-深色素微小RNA    英文名称：    HEM-d miRNA    规格:    1 µg
人成纤维细胞-胎儿微小RNA    英文名称：    HEF-f miRNA    规格:    1 µg
人成纤维细胞-新生儿微小RNA    英文名称：    HEF-n miRNA    规格:    1 µg
人成纤维细胞-成人微小RNA    英文名称：    HEF-a miRNA    规格:    1 µg
人毛乳头细胞微小RNA    英文名称：    HHDPC miRNA    规格:    1 µg
人生发基质细胞微小RNA    英文名称：    HHGMC miRNA    规格:    1 µg
人毛囊外根壳细胞微小RNA    英文名称：    HHORSC miRNA    干细胞规格:    1 µg