细胞培养基常用几种重要的添加成份及使用过程中应注意的问题

酚红在ATCC细胞培养基中用作pH值的指示剂，一般情况下，可以通过酚红的指示作用判断培养基的pH值，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色；但低血清或是无血清细胞培养基中酚红的含量与普通细胞培养基中的酚红含量不同，不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值，建议使用pH计进行测定。酚红通常对含血清的细胞培养基的生物制品质量并不会产生明显影响，也可通过纯化技术去除，但酚红在无血清细胞培养基中可能带来胞内钠/钾失衡，影响细胞生长，这种作用能被血清所中和或减轻。因此，酚红并不是细胞培养基中必需的一种成份，很多国外的疫苗或抗体企业在过程中都使用无酚红细胞培养基。
碳酸氢钠在ATCC细胞培养基中主要是作为缓冲系统，此外还具有调节渗透压的作用。通常产品使用说明中的碳酸氢钠推荐量是一个标准、安全量，是在科学的基础上根据实践经验所得，但是由于不同的细胞系（株）不同，同一株细胞适应环境也可能不同（细胞耐受性不同等），且存在的地域性水质差异等，在实际过程中也可稍作改动，但使用者需做相应的检测（理化及细胞试验等）。
HEPES是一种非离子缓冲液，在pH 7.2 ～7.4范围内具有较好的缓冲能力，其在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（0.34 g /L）共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。其安全浓度范围是10～25 mmol/L。
丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。
谷氨酰胺在溶液中很不稳定，4℃下放置1周可分解50%，使用中单独配制，置-20℃冰箱中保存，使用前加入ATCC细胞培养液中。