肿瘤细胞培养时注意事项

肿瘤细胞培养时注意事项
1.    玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;
2.    无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净，紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;
3.    培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内，用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取*培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天，肉眼见无浑浊或沉淀等异物。分装后置4度保存;
4.    消化液(pH7.8)或其它加入液，应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌，分装成支置-20度保存;
5.    培养箱应先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外线的应照射1小时以上，如有高温灭菌的应按程序来菌)。至少每月一次。
6.    进入操作时应注意先清洗双手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作时注意无菌台内空间层次。手及物品不要在暴露的瓶口上方来往，如果数量较多，培养瓶应放在与酒精灯平行地方便于操作，瓶与瓶之间应相隔一定的距离，开瓶(盖)时应先用75%酒精反复擦拭或用灯烧，打开后应用灯先烧口，然后烧盖。用完后同样操作。肿瘤细胞整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点。
Ana-1(小鼠巨噬细胞)    5×106cells/瓶×2
Anglne(人卵巢癌细胞)    5×106cells/瓶×2
AR42J(大鼠胰腺外分泌细胞)    5×106cells/瓶×2
ARPE-19(人视网膜上皮细胞)    5×106cells/瓶×2
AsPC-1(人胰腺癌细胞)    5×106cells/瓶×2
AtT-20(小鼠垂体瘤细胞)    5×106cells/瓶×2
B16(小鼠黑色素瘤细胞)    5×106cells/瓶×2
Bcap-37(人乳腺癌细胞)    5×106cells/瓶×2
BEL-7402(人肝癌细胞)    5×106cells/瓶×2
肿瘤细胞