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ATCC细胞的原代提取

更新时间:2018-04-26点击次数:320

目前,ATCC细胞的分离方法主要有三种:无血清培养基自然筛选法、流式细胞术分选法、免疫磁珠分选法。 
无血清培养基自然筛选法是迄今应用,也是zui简单和容易操作且行之有效的方法。其原理是利用特殊的培养基使成熟的神经细胞无法较长时间地成活,而分离筛选出能够在该培养条件下存活并繁殖的神经干细胞群体。 

步骤: (1)取胎脑; 
             (2)用吸管吹吸使细胞分散均匀; 
             (3)加小鼠神经干*培养基培养。

脂肪间质干细胞 
分离培养脂肪干细胞主要是通过胶原酶进行消化,获得细胞悬液。分离培养大鼠脂肪间质干细胞的大致步骤如下: 
        (1)取腹股沟处脂肪,充分剪碎; 
        (2)加入胶原酶,将其转移至离心管中进行消化30分钟,加入培养基终止消化; 
        (3)离心,大鼠脂肪间质干细胞培养基重悬,接种至培养瓶中。

骨髓间质干细胞 
目前常用的分离MSC的方法有密度梯度离心法和全骨髓贴壁法。全骨髓贴壁法的原理是根据间质干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化与扩增间质ATCC细胞的目的。 
步骤 : (1)取大鼠股骨和胫骨,以*培养基冲洗股骨和胫骨骨髓,转移至离心管中,离心,去上清; 
           (2)大鼠骨髓间质干细胞培养基重悬,接种培养; 
           (3)原代培养36h全液量换液,去除未贴壁的造血细胞,以后每3天换液一次,直到细胞80-90融合传代。

 错配修复蛋白6IgG 小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)

 大肠埃希杆菌O6IgG 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG) 

 大肠杆菌脂多糖IgG 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a) 

 代谢型谷氨酸受体1IgG 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)

 代谢型谷氨酸受体2IgG 小鼠5羟色胺(5-HT)

 代谢型谷氨酸受体5IgG 小鼠5核苷酸酶(5-NT)

 单核细胞趋化蛋白2(大、小鼠)IgG 小鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)

 单核细胞趋化蛋白2(人)IgG 小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)

 单核细胞趋化蛋白3(大、小鼠)IgG 小鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)

 单核细胞趋化蛋白3(人)IgG 小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)
ATCC细胞

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