转化细胞冻存液的配制方法

     转化细胞冻存是细胞培养、引种、保种和保证实验顺利进行的重要技术手段。在细胞建株和建系中，及时冻存原始细胞是十分重要的。在杂交瘤单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞、每次克隆化得到的亚克隆细胞的冻存保种常常是*的实验操作。因为在没有建立一个稳定的细胞系或稳定分泌抗体的细胞系的时候，细胞的培养过程中随时可能因细胞的污染、分泌抗体能力的丧失或遗传变异等导致实验失败，如果没有原始细胞的冻存，则因为上述的意外而前功尽弃。
1、常用冻存液组成成分
20％血清（FBS）、10％DMSO、70％1640培养液；或90％血清（FBS）、10％DMSO，更可防止细胞内冰晶形成。将DMSO和FBS加入DMEM中，各自含量占总体积的10%，然后滤膜过滤后分装保存备用。
2、DMSO在冻存液中的作用
DMSO在4℃时对细胞无明显毒性，分子量小、溶解度大、易透过细胞膜，降低细胞外未结冰溶液中溶质浓度，使细胞免受高浓度溶质的损伤,细胞内水分也不会过分外渗，避免了细胞过分脱水皱缩；DMSO与水分子结合，可使冰点下降，减少细胞内冰晶的形成，从而减少冰晶损伤。
3、转化细胞注意事项     
  1.DMSO 不用高压灭菌；DMEM不能高温高压灭菌，可以过滤除菌。
  2.DMSO要用新的，而且要避光保存。
  3.DMSO：含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)。

Pyridostigmine Bromide 200mg 溴吡斯的明标准品 101-26-8 

200mg B-D-半乳糖苷酶标准品 9031/11/2

L-Cysteine Hydrochloride 200mg L-半胱氨酸盐酸盐标准品 7048/4/6

Pentoxifylline 200mg 己酮可可碱标准品 6493/5/6

Proparacaine Hydrochloride 200mg 盐酸丙美卡因标准品 5875/6/9

Beclomethasone Dipropionate 200mg 丙酸倍氯米松标准品 5534/9/8

Mexiletine Hydrochloride 200mg 盐酸美西律标准品 5370/1/4

Diltiazem Hydrochloride 200mg 盐酸地尔硫卓标准品 1205003

Fluorometholone Acetate 200mg 氟米龙醋酸酯标准品 3801/6/7
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