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ELISA试剂盒背景深,全部呈有色原因

更新时间:2020-07-07点击次数:399

ELISA试剂盒背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值OD<0.2)
1 洗涤不充分,洗后未拍干,样品中其它成分残留或酶标记物残留洗液准确配制;充分洗涤,静置15秒,*拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染。
2 底物污染,未避光保存,出现颜色弃去底物,重新配置
3 样品稀释液污染弃去稀释液,重新配置
4 吸头重复使用,未洗净或消毒不*吸头尽可能一次性使用
5 不正确的孵育时间,温度(尤其是底物孵育的时间)为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。*按照说明书要求。
6 偶联抗体(streptavidin-HRP)浓度过高按照说明书调整到合适的浓度
7 ELISA板子不正确的贮存酶标板贮存于2-8 ℃;使用结合力低点的Elisa板
8 没有正确封闭在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间
9 样本溶血严重建议使用非溶血或轻微溶血样本,严重溶血样本会导致背景偏高。

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