人类乳头状瘤病毒33抗体HPV33 E7抗体的生物素化标记实验要点

人类乳头状瘤病毒33抗体HPV33 E7抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

AlkB同源蛋白8抗体
ABI基因家族成员3结合蛋白抗体
Rho GTP酶激活蛋白20抗体
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体
乙醛脱氢酶1蛋白家族L1抗体
轴抑制蛋白2抗体
血管生成素相关蛋白6抗体
Muellerian缪勒管激素抑制因子抗体
酪氨酸蛋白激酶受体A8抗体
脂肪酰辅酶A家族成员1抗体
芳香烃受体核转录蛋白样2抗体
磷酸化芳香胺N-乙酰化转移酶抗体
肌动蛋白结合蛋白1抗体
粘附分子IgG样结构域蛋白2抗体
肌动蛋白结合蛋白DOC6抗体
AFG3样蛋白2/脊髓小脑共济失调蛋白28抗体
激活素受体相互作用蛋白1抗体
醛固酮类还原酶家族7成员A2抗体
蛋白激酶AKT1,2,3抗体
帕金森病相关蛋白ATP13A2抗体
肌侧索硬化蛋白2抗体
磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
酰基辅酶A脱氢酶长链抗体
细胞分裂周期蛋白5抗体
β淀粉样肽/Aβ42抗体
ADCK4蛋白抗体
抑癌蛋白AIMP3抗体