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人抑制素(INH)免疫组化试剂盒操作步骤

更新时间:2021-11-11点击次数:459

人抑制素(INH)免疫组化试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

APOL6载脂蛋白样蛋白6抗体

ARTS凋亡相关蛋白TGFb信号抗体

A2LD1A2LD1蛋白抗体

A4GNTα1,4-N-乙酰葡糖胺转移酶α4Gn-T抗体

AADAC芳香乙酰胺脱乙酰基酶抗体

AADACL4芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白4抗体

AASDHPPT氨基乙二酸半醛脱氢酶磷酸泛酰巯基乙胺转移酶抗体

AASS赖氨酸酮戊二酸还原酶抗体

ANKRD6锚蛋白重复域6抗体

Arginase II精氨酸酶2抗体

AKR1C3醛固酮还原酶家族1成员C3抗体

ACTHR促肾上腺皮质激素受体

AGRP褐黑素相关蛋白ART抗体

Adrenodoxin肾上腺皮质线粒体铁氧还蛋白抗体

AdracalinAllgrove综合征相关蛋白抗体

AAV5 capsid protein VP1腺相关病毒5 VP1抗体

ALDH3A2脂肪醛脱氢酶抗体

AVPR1A抗利尿激素1A抗体

AVPR1B抗利尿激素受体1B抗体

ARFGEF2二磷酸腺苷核糖基化因子鸟嘌呤核苷酸交换因子2抗体

ATBF1α增强子结合蛋白1抗体

ATXN10脊髓小脑共济失调10抗体

AKAP7蛋白激酶A锚定蛋白7抗体

ABCA12腺苷三磷酸结合盒转运体12抗体

ABCB9腺苷三磷酸结合盒转运体9抗体

ABCD4三磷酸腺苷结合盒转运蛋白4抗体

ABLIM3肌动蛋白结合蛋白LIM3抗体

ACBD3高尔基复合体相关蛋白1抗体

ACACA乙酰辅酶A羧化酶1ACCα抗体

ANT1+ANT2+ANT3+ANT4腺嘌呤核苷酸转运蛋白1、2、3、4抗体

ADAM12去整合素样金属蛋白酶12

Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)磷酸化乙酰辅酶A羧化酶1ACCα抗体

AX2R膜粘连蛋白2受体抗体


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