小鼠血管/内皮成纤维抑制剂培养细胞培养操作规程

小鼠血管/内皮成纤维抑制剂培养细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。

延伸因子EF-1δ抗体大鼠骨织素(Ostn)ELISA Kit

延伸因子EF-1 γ抗体大鼠骨形态形成蛋白拮抗蛋白ELISA Kit

磷酸化真核翻译延长因子2抗体大鼠骨特性碱性磷酸酶C端肽ELISA Kit

磷酸化真核延伸因子激酶2抗体大鼠骨钙素(OT)ELISA Kit

纤连蛋白4抗体大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)ELISA Kit

延伸因子结合蛋白EFTUD2抗体大鼠谷胱甘肽还原酶(GR)ELISA Kit

表皮生长因子样蛋白6抗体大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)ELISA Kit

磷酸酶/磷酸二酯酶家族成员6抗体大鼠谷胱甘肽S转移酶θ1(GSTT1)ELISA Kit

核苷转运蛋白ENT1抗体大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA Kit

核苷转运蛋白ENT2抗体大鼠谷胱甘肽S转移酶Mu1(GSTM1)ELISA Kit

鸟嘌呤核苷酸交换因子4大鼠谷胱甘肽S转移酶(GSTs)ELISA Kit

磷酸化红细胞膜条带4.1蛋白抗体大鼠谷氨酰铵合成酶(GLUL)ELISA Kit

磷酸化酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体大鼠谷氨酰铵(Gln)ELISA Kit

蛋白激酶受体B1+B2抗体大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA Kit

磷酸化神经细胞鸟苷酸置换因子Ephexin1抗体大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA Kit

磷酸化Ephrin B抗体大鼠谷氨酸脱羧酶1(GAD1)ELISA Kit

恶性肿瘤丢失蛋白EPLIN抗体大鼠谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)ELISA Kit

磷酸化红细胞生成素受体抗体大鼠谷氨酸ELISA Kit

磷酸化HER2受体抗体大鼠钩端螺旋体IgG(Leptospira IgG)ELISA Kit

磷酸化HER2受体抗体大鼠高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)ELISA Kit