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抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链);2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种,重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中,不同抗体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨基酸序列。可变区位于"Y"的两臂末端。在可变区内有一小部分氨基酸残基变化特别强烈,这些氨基酸的残基组成和排列顺序更易发生变异区域称高变区。高变区位于分子表面,*多由17个氨基酸残基构成,少则只有2 ~ 3个。高变区氨基酸序列决定了该抗体结合抗原抗原的特异性。一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的,位于两臂末端称抗原结合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部称结晶片段(crystalline fragment,FC),糖结合在FC 上。
假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇,例如HBsAg的a决定簇,也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型,虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性,这也是用单抗作夹心法应注意的问题。
双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子(RF)的干扰。RF是一种自身抗体,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF,它可充当抗原成份,同时与固相抗体和酶标抗体结合,表现出假阳性反应。采用F(ab\')或Fab片段作酶结合物的,由于去除了Fc段,从而消除RF的干扰。双抗体夹心法ELISA是否受RF的影响,已被列为这类的一项考核指标。
双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
AGPHD1氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体
ASGPR1唾液酸糖蛋白受体1抗体
ARSF芳香基硫酸酯酶F抗体
AKAP5A激酶锚定蛋白5抗体
ATXN3L小脑脊髓共济失调蛋白3抗体
ASTE1ASTE1蛋白抗体
phospho-APG4B(Ser309)磷酸化自噬相关蛋白4B抗体
AFAP微丝相关蛋白1抗体
ADORA1腺苷A1A受体抗体
ARSB芳基硫酸酯酶B抗体
ABATγ氨基丁酸转氨酶抗体
A2BP1共济失调蛋白2结合蛋白1抗体
ADAM17肿瘤坏死因子α转换酶
ARNT2 芳香烃受体核转录蛋白2抗体
ABH8AlkB同源蛋白8抗体
ABI3BPABI基因家族成员3结合蛋白抗体
ARHGAP20Rho GTP酶激活蛋白20抗体
ASB10含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体
ALDH1L1乙醛脱氢酶1蛋白家族L1抗体
Axin 2轴抑制蛋白2抗体
ANGPTL6血管生成素相关蛋白6抗体
AMHMuellerian缪勒管激素抑制因子抗体
EphA8酪氨酸蛋白激酶受体A8抗体
ARNTL2芳香烃受体核转录蛋白样2抗体
phospho-AANAT (Thr29)磷酸化芳香胺N-乙酰化转移酶抗体
ABLIM1肌动蛋白结合蛋白1抗体
AMIGO2粘附分子IgG样结构域蛋白2抗体