人孤腓肽（OFQ/N）酶联免疫分析试剂盒操作步骤

人孤腓肽（OFQ/N）酶联免疫分析试剂盒操作步骤：

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。α1酸性糖蛋白2抗体（类粘蛋白2）Alpha 1 acid glycoprotein 2 0.2ml

磷酸化水通道蛋白2抗体phospho-AQP2(Ser264+261) 0.1ml

细胞酪氨酸转氨酶抗体ATTY 0.2ml

抗利尿激素/血管升压素/加压素/血管加压素抗体Vasopressin 0.1ml

ATP结合盒蛋白家族GCN20F家族1抗体ABCF1 0.1ml

醛糖还原酶抗体AKR1B1 0.2ml

人血清白蛋白抗体Serum albumin 0.1ml

活化转录因子4抗体ATF4 0.1ml

腺苷酸激酶-1抗体Adenylate Kinase 1 0.2ml

纤维状肌动蛋白抗体F-Actin 0.1ml

聚集蛋白抗体Agrin 0.1ml

调亡诱导因子抗体AIF 0.1ml

调亡诱导因子抗体AIF 0.1ml

间变型淋巴瘤激酶抗体ALK 0.2ml

膜粘连蛋白A1抗体Annexin A1 0.1ml