生发中心激酶样激酶抗体抗​体分子标记技术

生发中心激酶样激酶抗体抗体分子标记技术：

（一）原理

当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为残基,残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

（二）准备

1.试剂

经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；

（三）操作要点

1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；

2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；

4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；

5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；

6.碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

柱式水样DNAout

柱式土壤DNAout

柱式微生物基因组DNAout

柱式细菌DNAout（50次）

病毒DNA提取

96孔板病毒DNAout(离心法)（1次）

96孔板病毒DNAout(离心法)（5次）

96孔板病毒DNAout(真空法)（见关联产品）

M13噬菌体单链基因组DNAout（见关联产品）

λ噬菌体DNAout（见关联产品）

一管式病毒DNA-RNAout

一管式病毒DNAout（200次）

一管式病毒DNAout（50次）

柱式病毒DNAout

经典法质粒DNA提取

96孔板质粒DNAout(离心法)

96孔板质粒DNAout(真空法)（见关联产品）

大提无内毒素质粒DNAout

大提无内毒素质粒DNAout

大提柱式Ti质粒DNAout（见关联产品）

大提柱式质粒DNAout

革氏阳性细菌质粒DNAout

中提柱式BAC DNAout

柱式BAC DNAout

柱式Ti质粒DNAout（见关联产品）

柱式酵母质粒DNAout

柱式无内毒素质粒DNAout

柱式质粒DNAout(50次)

一步法质粒DNA提取

一步法96孔板单菌落质粒DNAout（离心法）（停产）

一步法96孔板单菌落质粒DNAout（离心法）（停产）

一步法96孔板单菌落质粒DNAout（真空法）（见关联产品）

一步法96孔板质粒DNAout（离心法）

一步法96孔板质粒DNAout（真空法）（见关联产品）

一步法大提质粒DNAout