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*、肿瘤耐药细胞株的生长情况
胚胎干细胞性很高,可以分化成各种细胞,细胞株能够传到40-50代,但遗传物质没有发生改变。而细胞系是细胞传至50代以后生存下来,细胞的遗传物质发生了改变,并且带有癌变的特点。有可能在培养条件下无限增殖。安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下观察整个细胞生长情况。
1.如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
2.如果细胞已长满,即可进行传代培养。
第二、肿瘤耐药细胞株的具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若干细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。
第三、肿瘤耐药细胞株的注意事项:
1.观察细胞在低倍镜下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2.瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3.有些干细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。