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3004901493
如果ATCC细胞是单层贴壁生长:
1.无菌操作,取出大约5至10ml的运输培养基。运输培养基可以保存在4℃备用。
2.将培养瓶放在产品说明书中推荐的温度和CO2浓度下培养(大多数细胞系为37℃与5%CO2)直到细胞可以传代培养。
如果ATCC细胞不贴壁或是悬浮状态生长:
1.在无菌条件下,将培养瓶的全部内容物转移到离心管中。
2.在125×g转速下离心5~10 min。
3.取出大约10 ml运输培养基的上清液,并重悬细胞。将取出的运输培养基储存在4℃备用。
4.无菌条件下,转移悬浮细胞到25 cm2或75 cm2的培养瓶中,培养瓶大小取决于细胞株(见产品说明书)。
5.按照产品说明书中推荐的温度和CO2浓度培养细胞,直到细胞可以传代培养。原代细胞来源于一块碎的或酶消化的组织。原代培养物,是多种类型细胞的混合物,保留了其来源组织的特点。
一段时间后,原代培养的细胞会达到融合状态,即在培养瓶中的所有可用空间由于细胞扩增都被覆盖。在此之后,细胞需要消化(通常用蛋白水解酶,如胰蛋白酶)为单个细胞并且传代(分裂,传代或转移)。在*次传代以后,培养物通常被称为一个细胞系。
每一次传代培养,细胞群体由于快速生长的细胞占主导地位而变得更均匀。具有所需特性的细胞也可以通过克隆,从培养物中选出。二倍体细胞很少可以倍增超过几代。它们只有有限的复制能力,并且在细胞倍增20至80次后开始减缓并zui终停止分裂。
zui近的证据表明,某些细胞中观察到的ATCC细胞衰老与预计的复制性衰老不同,可能是由于不适当的培养条件导致的。还有其他数据显示,对某些物种的细胞系(尤其是人源的)即使生长在改进的培养条件下仍存在复制衰老。这种衰老是由细胞分裂时染色体末端(端粒)缩短调控的。
常温,避光 含量测定 *: 双香豆素 规格: 100mg
常温,避光 TLC法检查用 *: 双氰胺 规格: 50mg
常温,避光 含量测定 *: 水杨酸镁 规格: 50mg
常温,避光 含量测定 *: 司坦唑醇 规格: 100mg
常温,避光 含量测定 *: 苯妥英钠 规格: 50mg
ATCC细胞