转化细胞常用纯化方法

  转化细胞人工纯化是利用人为手段造成对某一细胞生长有利的环境条件，抑制其他细胞的生长从而达到纯化细胞的目的。
1、细胞时间差酶消化法：
酶消化法是比较常用的纯化方法，不仅对贴壁细胞可行，能利用上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶的耐受性不同，是两者分开，达到纯化的目的；另外对贴壁细胞与半贴壁细胞及黏附细胞间的分离纯化也是十分有效的。
两者在胰蛋白酶的作用下，由于成纤维细胞先脱壁，而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁，特别是在原代细胞初次传代和早期传代中两种差别尤为明显，故可采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开，方法步骤如下：
采用常规消化传代方式将0.25%胰蛋白酶注入培养瓶内两次，每次加1ml（25ml培养瓶），来回轻摇1-2次，使胰蛋白酶流过所有细胞表面，然后倒掉。
盖好瓶塞，将培养瓶放在倒置显微镜下观察，发现成纤维细胞变园，部分脱落，立即加入2ml有血清的培养基终止消化。
用弯头吸管轻轻吹打成纤维细胞生长区域（可事先在镜下用记号笔在培养瓶上划出记号）。吹打时不要用力，也不要吹打上皮细胞生长区域。吹打结束后，再用少量培养基漂洗一遍，然后加入适量培养基于瓶内继续培养，也可重复上述操作再进行一次。
隔几日后或下次传代时，再进行上述操作，进过几次处理，就可将成纤维细胞去除或者将两者分开。
2、细胞培养机械刮除法：
原代培养时，如果上皮转化细胞和成纤维细胞分为区成混杂生长，每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。可采用机械的方法去除不需要的细胞区域而保留需要的细胞区域，其方法步骤如下 ：
将要纯化细胞的培养瓶，在净化室内放在倒置显微镜监视下进行操作。
用硅橡胶刮子在不需要生长的细胞区域推划，使细胞悬浮在培养基中，注意不要伤及所需细胞。
推划后用培养基冲洗振摇两次倒掉，即可将培养基加入原瓶继续培养。
数日后如发现不需要的细胞又长出，可再进行上述操作，这样反复多次可以纯化细胞。操作过程中要严格无菌操作，防止污染。
≥98%    规格:        *：    Curcumol    莪术醇    
≥98%    规格:        *：    (+)-Catechin    儿茶素    
≥96%    规格:        *：    Dihydrotanshinone I    二氢丹参酮 I    
≥95%    规格:        *：    Dihydrocapsaicin    二氢辣椒碱    
≥99%    规格:        *：    Dihidromethysticin    二氢麻醉椒苦素    
≥97%    规格:        *：    Columbianadin    二氢欧山芹醇当归酸酯    
≥98%    规格:        *：    Dihydrolycorine    二氢石蒜碱  
转化细胞