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ATCC细胞固定后之抗原修复

更新时间:2017-09-22点击次数:202

ATCC细胞大多数甲醛固定的组织在开始染色之前都需要先修复抗原,这是由于在固定过程中产生了亚甲基桥使蛋白之间交联屏蔽了抗原位点。两种抗原修复方法为热修复法(称之为热诱导抗原表位修复或HIER)和酶解法。这些修复方法原理都是将亚甲基桥打断,使抗原表位暴露出来,以便于抗体结合。有的抗原适合酶解修复,有的抗原适合热修复。酶解修复有时会损坏组织的形态结构,因此需要摸索酶浓度和作用时间。
热修复法
热抗原修复方法有高压蒸汽法、微波法或蒸煮锅法。或者将玻片置于修复溶液中60°C水浴过夜。除非抗原修复方法在抗体数据表中可以找到,否则必须通过实验来确定适宜的修复。
ATCC细胞热修复缓冲液:
1)枸橼酸钠缓冲液(10 mM Sodium Citrate, 0.05% 吐温- 20, pH 6.0);
2)1 mM EDTA, 调至pH 8.0;
3)Tris/EDTA 缓冲液(10mM Tris, 1 mM EDTA 溶液, 0.05% 吐温-20, pH 9.0)。
对于一个特定的抗体,在没有其他研究者建议的情况下,要通过实验确定选用哪种修复缓冲液。
热修复法,使用的修复液、处理的方法、温度和时间都需要适当的摸索。
规格:    Multi-class antibodies    Anti-nectin 2/CD112  细胞黏附分子CD112抗体     0.2ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-nectin 2/CD112/FITC  荧光素标记细胞黏附分子CD112抗体IgG     0.2ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-nectin 2/CD112/FITC  荧光素标记细胞黏附分子CD112抗体IgG     0.2ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-NEDD4L/NEDD4-2  泛素连接酶NEDD4-2抗体     0.2ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-NEDD4L/NEDD4-2/FITC  荧光素标记泛素连接酶NEDD4-2抗体IgG     0.2ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-NEDD4L/NEDD4-2/FITC  荧光素标记泛素连接酶NEDD4-2抗体IgG     0.2ml
ATCC细胞

 

 

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