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ATCC细胞支原体污染的荧光检测方法

更新时间:2017-09-29点击次数:204

ATCC细胞利用萤光染剂(bisbenzimide, Hoechst 33258)侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域,因为支原体之DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之萤光小点,即为支原体之DNA,证明有支原体之污染。

测试步骤用间接步骤,将待测细胞悬浮液或细胞培养液接种于指示细胞培养液中(indicator cell,例如Vero cell or 3T6 cell),然后培养指示细胞再作萤光染色。正负反应对照组亦可以接种于indicator cell内作为对照。

待测细胞亦可作直接测试,但需为吸附型ATCC细胞,培养后直接作萤光染色。有些细胞易有萤光背景,而干扰结果判读,则建议使用接种于指示细胞之步骤。

特点:简单、经济与灵敏,广泛使用,可作为例行之侦测步骤。可以侦测不易培养之支原体,例如M. hyorhinis,较直接培养法快,约一星期即可知道结果。

缺点:有时仍会有萤光背景,影响判读。
进口、国产    英文名称:    (S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸    BOC-L-Homophenylalanine    含量:    BR,98%
进口、国产    英文名称:    (R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸    BOC-D-Homophenylalanine    含量:    BR,98%
进口、国产    英文名称:    甘氨酸单钠盐    Sodium Glycinate    含量:    BR,98%
进口、国产    英文名称:    L-(+)-羟甲基吡咯烷    L-Prolinol    含量:    BR,98%
进口、国产    英文名称:    N-(氨基亚氨基甲基)-N-甲基甘氨酸    Creatine    含量:    BR,98%
进口、国产    英文名称:    L-2-乙酰氨基-3-甲基丁酸    N-Acetyl-L-Valine    含量:    BR,98%
进口、国产    英文名称:    N-乙酰基-DL-色氨酸    N-Acetyl-DL-tryp tophane    含量:    BR,98.5%
进口、国产    英文名称:    N-乙酰氨基乙酸    N-Acetyl-glycine    含量:    BR,99%
ATCC细胞

 

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