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更新时间:2017-01-03
厂商性质:经销商
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人胚肝二倍体细胞;CCC-HEL-1图片质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人胚肝二倍体细胞;CCC-HEL-1图片操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 取材自引产的15周胚胎组织,中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
传代方法 1:3传代;3~4天1次。
传代情况 P6
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:12;D18S51:13,20;D6S1043:12,18;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,20,;D3S1358:14,15;D5S818:12,13;D7S820:10;D8S1179:13,14;FGA:21,23;Penta E:14,16;vWA:16;
同工酶
染色体 46,XY
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
--)-Methylenedioxy Pyrovalerone (5 mg)(-)-MDPV, --)-Methylenedioxy Pyrovalerone, 1-(benzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-2-(pyrrolidin-1-yl)pentan-1-one
11-dehydro Thromboxane B2 (250 ug)11-keto TXB2|11-dehydro TXB2, 11-dehydro Thromboxane B2, 9α,15S-dihydroxy-11-oxothromba-5Z,13E-dien-1-oic acid
Corey PG-Lactone Diol (10 g)Corey PG-Lactone Diol, (3aR,4R,5R,6aS)-hexahydro-5-hydroxy-4-[(1E,3S)-3-hydroxy-1-octenyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2-one
(S)-(+)-Eicosapentaenyl-2 -Hydroxy-1 -Propylamide (10 mg)(S)-(+)-Eicosapentaenyl-2 -Hydroxy-1 -Propylamide, N-((S)-1-hydroxypropan-2-yl)icosa-5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-pentaenamide
两性霉素B(1GM)Amphotericin B , CAS 1397-89-3; MW 924.08; ≥800ug/mg; USP
赤霉素(溶液)(100ML)Gibberellic Acid (GA3) Solution, 1 mg/ml in H2O. Sterile Filtered
肌醇(10KG)myo-Inositol, CAS# 87-89-8; ≥99%
磷酸氢二钠七水合物(1KG)Sodium Phosphate, Dibasic, Heptahydrate, ACS Grade; Cas# 7782-85-6; Formula: Na2HPO4
D--麦芽糖一水合物(25KG)D-Maltose, Monohydrate, CAS# 6363-53-7; MW 360.6
磺酰罗丹明B 荧光参照标准Sulforhodamine B Fluorescence reference standard
6-TRITC; R 异构体 [四甲基罗丹明-5-异硫氰酸]6-TRITC; R isomer [Tetramethylrhodamine-6-isothiocyanate]
TF3 酸 的Cy3替代品Tide Fluor 3 acid [TF3 acid] Superior replacement to Cy3
EDANS标记的Lys赖氨酸FMOC-Lys(DABCYL)-OH
MMP Red红色荧光底物MMP Red substrate鸡胚成纤维细胞英文名称:DCE
卵磷脂(蛋黄)/蛋黄软磷脂/磷脂酰胆碱/蛋黄卵磷脂/磷脂蛋黄素/Lecithin from egg yolkBR10克国产/进口
大鼠脑静脉血管平滑肌细胞*培养基100mL
HCT-15(人结肠细胞)5×106cells/瓶×2
改良沙氏琼脂培养基/Sabouraud′s Agar,Modified真菌检测250克国产/进口
NCI-H1650(人非小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
锰营养琼脂培养基/Manganese Nutrient Agar Medium250克国产/进口
大鼠关节软骨细胞*培养基100mL
胃蛋白胨BR250克国产/进口
SW480(人结肠细胞)5×106cells/瓶×2
RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
Poly-D-lysine溶液规格:2mggersion
Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2
MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞gersion
NRK(大鼠肾细胞)5×106cells/瓶×2
HSC-T6(大鼠肝星形细胞)5×106cells/瓶×2
BRL(大鼠肝细胞)5×106cells/瓶×2
EBTr (NBL-4) (牛胚气管细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腺英文名称:EMT-6
Ana-1(小鼠巨噬细胞)5×106cells/瓶×2
EGTA,四钠盐 超级纯EGTA tetrasodium salt UltraPure Grade
膜电位荧光探针DiSBAC2(3)DiSBAC2(3) [Bis-(1,3-diethylthiobarbituric acid)trimethine oxonol]
iFluor 532琥珀酰SEiFluor 532 succinimidyl ester
Resorufin beta-D-galactopyranosideResorufin beta-D-galactopyranoside