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人正常乳腺上皮细胞；MCF 10A图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人正常乳腺上皮细胞；MCF 10A图片
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法  1:2。3天内可长满。
传代情况97
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量，使的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃

DNA  DTT( 二硫代苏糖 )    10g
DNA  EDTA 2Na    100g
DNA  EDTA 溶液 ,0.5M,PH8.01     100mL
DNA  Guanidine HCl( 盐酸胍 )    100g
DNA  GuSCN( 异硫氰酸胍 )    100g
DNA  PVP K30 溶液，20%    100mL
DNA  PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)    100g
DNA  Sarkosyl 溶液，10%    100mL
DNA  Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸钠 )    100g
DNA  SDS 溶液，10%    100mL
DNA  SDS( 十二烷基硫酸钠 )    100g
DNA  Tris Base( 三羟甲基氨基甲烷 )    100g
DNA  Tris HCl，1M，pH6.5    100mL
DNA  Tris HCl，1M，pH7.0    100mL
DNA  Tris HCl，1M，pH7.5    100mL
DNA  Tris HCl，1M，pH8.0    100mL
DNA  Tris HCl，1M，pH8.5    100mLEpalrestat （25 mg）5Z-[（2E）-2-methyl-3-phenyl-2-propen-1-ylidene]-4-oxo-2-thioxo-3-thiazolidineacetic acid； Kinedak|ONO-2235|Sorbistat； Epalrestat
Fluprostenol-d4 （500 ug）9α，11α，15R-trihydroxy-16-（3-（trifluoromethyl）phenoxy）-17，18，19，20-tetranor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic-3，3，4，4-d4 acid； 16-m-trifluoromethylphenoxy tetranor Prostaglandin F2α-d4； Fluprostenol-d4
Inulin Standard （2 mg）Inulin Standard
CP 47，497-C9-homolog （5 mg）cis-5-（1，1-dimethylnonyl）-2-（3-hydroxycyclohexyl）-phenol； CP 47，497-C9-homolog
5-chloro AB-PINACA （1 mg）N-（1-amino-3-methyl-1-oxobutan-2-yl）-1-（5-chloropentyl）-1H-indazole-3-carboxamide； 5-chloro AB-PINACA
Topiramate （500 mg）2，3:4，5-bis-O-（1-methylethylidene）-β-D-fructopyranose 1-sulfamate； Topamax |TPM|Epitomax|McN 4853|RWJ 17021； Topiramate
cis-4,10,13,16-Docosatetraenoic Acid （1 mg）4Z,10Z,13Z,16Z-docosatetraenoic acid
Rofecoxib （500 mg）MK 966|Vioxx； 4-[4-（methylsulfonyl）phenyl]-3-phenyl-2（5H）-furanone
Piperine （100 g）Bioperine|N-Piperoylpiperidin|NSC 21727； （2E,4E）-5-（1,3-benzodioxol-5-yl）-1-（1-piperidinyl）-2,4-pentadien-1-one
（±）9-HEPE （100 ug）（±）-9-hydroxy-5Z，7E，11Z，14Z，17Z-eicosapentaenoic acid； （±）9-HEPE
（±）11-HETE （100 ug）（±）11-hydroxy-5Z，8Z，12E，14Z-eicosatetraenoic acid； （±）11-HETE
（±）-Jasmonic Acid （250 mg）3-oxo-2R-（2Z）2-penten-1R-yl-cyclopentaneacetic acid； （±）-Jasmonic Acid
Thrombin （human） （100 U）Activated Factor II [IIa]
JNJ-10397049 （10 mg）N-（2,4-dibromophenyl）-N’-[（4S,5S）-2,2-dimethyl-4-phenyl-1,3-dioxan-5-yl]-urea
NMDA （250 mg）N-Methyl-D-Aspartic Acid； N-methyl-D-aspartic acid
25I-NBOH （hydrochloride） （5 mg）2；C-I-NBOH； 2-（（（4-iodo-2,5-dimethoxyphenethyl）amino）methyl）phenol, monohydrochloride
DNA  Tris HCl，1M，pH9.0    100mL
DNA  Triton    100mL