人肺成纤维细胞；HFL1*采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

人肺成纤维细胞；HFL1*操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。

人肺成纤维细胞；HFL1*现货直销，免费快递送货上门。公司供应各种细胞株，细胞系，种类齐全，现货，质量保证，公司所有产品仅供科研使用，不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

细胞名称
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  
培养条件  F12K  优质胎牛血清，10%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(10+5)
冻存条件  *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
运输保存：
采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。
保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存
用途：只可用于科研。
储存：液氮。
运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基，这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。
注意：*次植入后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性，支持客户检测对应的biomarker，（如证明细胞错误，全额退款。）公司针对每株细胞，鉴定gene background，鉴定完成的细胞可以提供数据，用于证明细胞的真实性，并且帮助客户更多的了解细胞特性。

DpnI    500U
DTT，蛋白    5g
DTT，免称量蛋白    48 管
dTTP 溶液，100mM    0.5mL
dTTP 溶液，2.5mM    2mL
dUTP 溶液，100mM     0.4mL
大肠杆菌 DNA 连接酶    1000U
大肠杆菌零诱导培养基    100mL
大片段 DNA 分子量标准    50μg
大鼠 NK 细胞分离液 1.068    200mL
大鼠白细胞分离液 1.084    200mL
大鼠单核细胞分离液 1.082    200mL
大鼠粒细胞分离液 1.119    200mL
大鼠淋巴细胞分离液 1.083    200mL
大鼠内皮细胞分离液 1.066    200mL
大鼠胰岛细胞分离液 1.063    200mL
大鼠中性粒细胞分离液 1.091    200mL
大鼠瘤细胞分离液 1.061    200mL
大提无内毒素质粒 DNAout    10 次
大提无内毒素质粒 DNAout    5次β-Nicotyrine （5 mg）NSC 127943|NSC 407276|α-Nicotyrine； 3-（1-methyl-1H-pyrrol-2-yl）-pyridine
AB-CHMINACA metabolite M4 （5 mg）1-（cyclohexylmethyl）-1H-indazole-3-carboxylic acid
CBL-018 （1 mg）naphthalen-1-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate
X-Gal5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Galactopyranoside； 5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl-β-D-galactopyranoside
BVT 948 （10 mg）4-hydroxy-3,3-dimethyl-2H-benz[g]indole-2,5（3H）-dione
LY2811376（4S）-4-[2,4-difluoro-5-（5-pyrimidinyl）phenyl]-5,6-dihydro-4-methyl-4H-1,3-thiazin-2-amine
Tesaglitazar （10 mg）AZ 242|GalidaTM； （αS）-ethoxy-4-[2-[4-[（methylsulfonyl）oxy]phenyl]ethoxy]-benzenepropanoic acid
Clinafloxacin （hydrochloride） （250 mg）AM1091； 7-（3-ami-pyrrolidinyl）-8-chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid
MCC-555 （5 mg）Isaglitazone|Netoglitazone|RWJ 241947； 5-[[6-[（2-fluorophenyl）methoxy]-2-naphthalenyl]methyl]-2,4-thiazolidinedione
Deltarasin （hydrochloride） （10 mg）2-[4-[（2S）-2-（2-phenyl-1H-benzimidazol-1-yl）-2-（4-piperidinyl）ethoxy]phenyl]-1-（phenylmethyl）-1H-benzimidazole, hydrochloride
Difenoxin （hydrochloride） （5 mg）Diphenoxylic Acid|R 15403； 1-（3-cyano-3,3-diphenylpropyl）-4-phenyl-4-piperidinecarboxylic acid, monohydrochloride
EC 23 （10 mg）AGN 190205|BASF 46928； 4-[2-（5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl）ethynyl]-benzoic acid
Δ8-THC CRM （2 mL）NSC 134453|Δ8-Tetrahydrocannabinol； 6aR,7,10,10aR-tetrahydro-6,6,9-trimethyl-3-pentyl-6H-dibenzo[b,d]pyran-1-ol