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人淋巴细胞；1301图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人淋巴细胞；1301图片
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性   
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法 
传代情况 Unknown
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 B类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

F12K 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )    500mL
F12K 液体培养基 ( 无血清和双抗 )    500mL
Ficoll-Paque 介质    100mL
Flemming 固定液    250 mL
Fluo-3，五铵盐    1mg
Fluo-3AM( 钙离子荧光探针 )    250μL
Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM    25μL
Fluorescein-5-maleimide    25mg
Forskolin( 腺苷酸环化酶激活剂 )    1mg
FTA 血片 DNAout    50 次
Fura-2 AM( 钙离子荧光探针 )    1mg
Fura-2，五铵盐    1mg
Furin 蛋白酶    50U
番红 O    5g
反玉米素    50mg
放素 D    1mg
放素 D 溶液 ,1mg/mL    1mL
放酮    100mg
放酮溶液 ,100mg/mL    1mL
非变性蛋白分子量标准    25mg
非变性法蛋白沉淀试剂盒    10 次
非蛋白型 Western 封堵液    250mL2-chloro-3-Deazaadenosine （10 mg）6-chloro-1-β-D-ribofuranosyl-1H-imidazo[4，5-c]pyridin-4-amine； 2-CADO|6-Amino-2-chloropurine riboside|NSC 158902-chloro-3-Deazaadenosine
4-chloro-α-Cyanocinnamic Acid （5 mg）3-（4-chlorophenyl）-2E-cyano-2-propenoic acid； Cl-CCA； 4-chloro-α-Cyanocinnamic Acid
AM2201 N-（4-fluoropentyl） isomer （1 mg）（1-（4-fluoropentyl）-1H-indol-3-yl）（naphthalen-1-yl）methanone； AM2201 N-（4-fluoropentyl） isomer
JWH 210 7-ethylnaphthyl isomer （5 mg）（7-ethyl-1-naphthalenyl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）-methanone； JWH 234； JWH 210 7-ethylnaphthyl isomer
2，3-Methylenedioxymethcathinone （hydrochloride） （50 mg）1-（benzo[d][1，3]dioxol-4-yl）-2-（methylamino）propan-1-one， monohydrochloride； 2，3-MDMC； 2，3-Methylenedioxymethcathinone （hydrochloride）
5，6-dehydro Arachidonic Acid （100 ug）8Z，11Z，14Z-eicosatrien-5-ynoic acid； 5，6-dehydro AA； 5，6-dehydro Arachidonic Acid
9（Z），11（E）-Conjugated Linoleic Acid （100 mg）9Z，11E-octadecadienoic acid； 9Z，11E-CLA|Bovinic acid； 9（Z），11（E）-Conjugated Linoleic Acid
N-Oleoyl Glycine （50 mg）N-（9Z-octadecenoyl）-glycine； N-Oleoyl Glycine
5（S），6（R），15（R）-Lipoxin A4 （50 ug）5（S），6（R），15（R）-trihydroxy-7E，9E，11Z，13E-eicosatetraenoic acid； 5（S），6（R），15（R）-LXA4|AT-Lipoxin A4|15-epi Lipoxin A4； 5（S），6（R），15（R）-Lipoxin A4
Biphenylindanone A （10 mg）3’-[[（2-cyclopentyl-2，3-dihydro-6，7-dimethyl-1-oxo-1H-inden-5-yl）oxy]methyl]-[1，1’-biphenyl]-4-carboxylic acid； BINA|MRLSD 23Biphenylindanone A
Etizolam （5 mg）4-（2-chlorophenyl）-2-ethyl-9-methyl-6H-thieno[3，2-f][1，2，4]triazolo[4，3-a][1，4]diazepine； AHR 3219|Depas|Y 7131； Etizolam