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产品型号:
更新时间:2017-01-05
厂商性质:经销商
访问量:439
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人胚肺细胞VA13细胞;WI-38 VA13亚系2RA价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人胚肺细胞VA13细胞;WI-38 VA13亚系2RA价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系衍生自WI-38细胞。WI-38细胞感染低滴度的SV40病毒,经过连续传代、克隆选择获得多株亚系,其中2RA亚系含有SV40 neo (T)和转移抗原,从而改变其有限细胞系的特性,可在常规条件下连续传代。该细胞系的实验操作甚少在生物安全P2级条件下进行。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C265
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒 100 次
谷胱甘肽还原酶检测试剂盒 100 次
谷胱甘肽琼脂糖 2mL
谷胱甘肽一还原酶测试盒 50 T
骨骼肌细胞生长因子 5mL
钴柱介质 10mL
固蓝 BB 盐 5g
固蓝 RR 盐 5g
固绿 5g
固相 RNase 清除剂 100mL
固相 RNase 清除剂 250mL
固相内毒素清除剂 100g
固相内毒素清除剂 500g
硅基磁珠 2mL
硅胶膜 DNA 离心吸附柱 ( 大提 ) 1套
硅胶膜离心吸附柱 ( 大提 ) 收集管 1只
硅胶膜离心吸附柱 ( 小提 ) 收集管 50 只
硅胶膜离心吸附柱系列 ( 小提 ) 50 套
硅胶膜离心吸附柱再生液 500 次
鲑鱼精 DNA 100mg5-fluoro SDB-005 (1 mg)naphthalen-1-yl 1-(5-fluoropentyl)-1H-indazole-3-carboxylate
ML-60218 (5 mg)2-chloro-N-[3-(5-chloro-3-methylbenzo[b]thien-2-yl)-1-methyl-1H-pyrazol-5-yl]-benzenesulfonamide
Lamotrigine (10 mg)BW 430C|Epilepax|LTG|Lamictal; 6-
Zidovudine (100 mg)AZT|Azidothymidine|NSC 602670|Retrovir|ZDV; 3’-
Diclazepam (5 mg)2’-Chlorodiazepam|Ro 5-3448; 7-chloro-5-(2-chlorophenyl)-1,3-dihydro-1-methyl-2H-1,4-benzodiazepin-2-one
Conoidin A (50 mg)2,3-bis(bromomethyl)-quinoxaline 1,4-dioxide
2C-T-2 (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)2,5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine; 4-(ethylthio)-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride
Ivabradine (hydrochloride) (50 mg)S 16257; 3-[3-[[[(7S)-3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-yl]methyl]methylamino]propyl]-1,3,4,5-tetrahydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one, monohydrochloride
Edrophonium (chloride) (250 mg)Enlon|Tensilon; N-ethyl-3-hydroxy-N,N-dimethyl-benzenaminium, monochloride
MF498 (25 mg)N-[[[4-(5,9-diethoxy-6,8-dihydro-6-oxo-7H-pyrrolo[3,4-g]quinolin-7-yl)-3-methylphenyl]methyl]sulfonyl]-2-methoxy-benzeneacetamide
Zalcitabine (500 mg)2’,3’-Dideoxycytidine|Hivid|NSC 606170|Ro 24-2027/000|ddC; 2’,3’-dideoxy-cytidine
Cefpodoxime (free acid) (100 mg)R 3763; (6R)-7R-[[(2Z)-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(methoxyimino)acetyl]amino]-3-(methoxymethyl)-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid
N-Acetyl-4-benzoquinone imine (5 mg)N-Acetyl-p-benzoquinonimine|NAPQI; N-(4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)-acetamide
鲑鱼精 DNA 溶液 1mL
果胶 25g
果胶酶 100mg
果胶酶 Y-23 100mg
过硫酸铵 25g