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更新时间:2017-01-05
厂商性质:经销商
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人胚肾293细胞;HIK293ar价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人胚肾293细胞;HIK293ar价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
硫柳 25g
硫脲 25g
硫酸铵 100g
硫酸肼 25g
硫酸卡那霉素 1g
硫酸卡那霉素干粉 1g
硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL 10mL
硫酸链霉素 5g
硫酸链霉素溶液 ,50mg/mL 10mL
硫酸镁七水 100g
硫酸葡聚糖 1g
硫酸葡聚糖 10g
硫酸庆大霉素 500mg
硫酸庆大霉素溶液 ,15mg/mL 2mL
硫酸铁 100g
硫酸新霉素 10g
硫酸新霉素干粉 1g
硫氧还蛋白 5mg
鲁米诺 1g
鲁米诺血迹鉴定试剂盒 100mLCannabidiol CRM (2 mL)CBD; 2-[1R-3-methyl-6R-(1-methylethenyl)-2-cyclohexen-1-yl]-5-pentyl-1,3-benzenediol
Streptavidin:HRP (1 mg)Streptavidin:HRP
小鼠心脏组织核提取物Mouse Heart Nuclear Extract (500 ug)
Z-VEID-FMK, Caspase-6抑制剂(氟甲基酮)Caspase-6 Inhibitor Z-VEID-FMK
Z-DEVD-FMK, Caspase-3抑制剂(氟甲基酮)Z-DEVD-FMK
SKI-607Bosutinib (SKI-606)
2-(4-Ami-isopropyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-3-yl)-1H-indol-5-olPP242
6-((2-((4-(2,4-Dichlorophenyl)-5-(4-methyl-1H-imidazol-2-yl)pyrimidin-2-yl)amino)ethyl)amino)nicotinonitrile; CT99021EZSolution CHIR99021
Stem Cell Fate Regulator套装IDiscoveryPak Stem Cell Fate Regulator Set I
5-Chloro-N-(2-chloro-4-nitrophenyl)-2-hydroxybenzamideNiclosamide
1α, 25-Dihydroxycholecalciferol; 1a,25-Dihydroxyvitamin D3; 25-(OH)2-D3Calcitriol
N-(4-((6,7-Dimethoxyquinolin-4-yl)oxy)phenyl)-N-(4-fluorophenyl)cyclopropane-1,1-dicarboxamideCarbozantinib
POE (20) sorbitan monooleate, Polyethylene glycol sorbitan monooleate, Polyoxyethylenesorbitan monooleate, Polysorbate 80Tween 80, MegaPure Detergent, 10% Solution
N-Hydroxy-1,3-dioxo-1H-benz[de]isoquinoline-2(3H)-hex*Scriptaid
Dodecyl maltosideDodecyl-β-D-maltopyranoside
N-(4-Chloro-3-trifluoromethyl-phenyl)-2-ethoxy-6-pentadecyl-benzamideHAT Activator, CTPB
2-Amino-9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-tetrahydrofuranyl]-3,7-dihydropurine-6,8-dione; 8-Oxoguanosine8-Hydroxyguanosine
卵白蛋白 1g
卵白蛋白标准品,2mg/mL 1mL
卵巢上皮细胞生长因子 5mL
卵磷脂 ( 大豆 ) 25g