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Sars结构蛋白表达株；293 001B图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 Sars结构蛋白表达株；293 001B图片
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  表达Sars结构蛋白 
培养条件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS；500ug/ml IL-2
传代方法  1:6传代；2~3天1次
传代情况 P10
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：12，14；D16S539：9；D18S51：18，22；D19S433：18；D21S11：28，30.2；D2S1338：19；D3S1358：15，17；D5S818：8，9；D7S820：11，12；D8S1179：12，14；FGA：23，24；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，19；
同工酶 
染色体  
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

生物素化的牛血清白蛋白    25mg
生物素化山羊抗亲和素    0.5mg
生物素化兔 IgG    5mg
湿法电转液 ( 干粉 )    20L
湿润剂 P-40    100mL
十二烷基磺酸钠    100g
十二烷基磺酸钠清除剂    25mL
十二烷基肌氨酸钠    25g
十二烷基硫酸钠    100g
十六烷基*基溴化铵    25g
石蜡包埋组织 DNAout    30 次
石蜡包埋组织 RNAout    30 次
石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒    50 次
石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒    30 次
石蜡油，PCR     10mLNaringenin （1 g）2S，3-dihydro-5，7-dihydroxy-2-（4-hydroxyphenyl）-4H-1-benzopyran-4-one； S-Dihydrogenistein|NSC 11855|NSC 34875|Salipurol； Naringenin
Magnolol （25 mg）5，5’-di-2-propen-1-yl-[1，1’-biphenyl]-2，2’-diol； NSC 293099； Magnolol
Hygromycin B （500 mg）O-6-amino-6-deoxy-L-glycero-D-galacto-heptopyranosylidene-（1→2-3）-O-β-D-talopyranosyl-（1→5）-2-deoxy-N3-methyl-D-streptamine； Hygromycin B
JWH 081 N-pentanoic acid metabolite （1 mg）5-（3-（4-methoxy-1-naphthoyl）-1H-indol-1-yl）pentanoic acid； JWH 081 N-pentanoic acid metabolite
SIRT1/2 Inhibitor IV （1 mg）2，3-dihydro-5-[（2-hydroxy-1-naphthalenyl）methyl]-6-phenyl-2-thioxo-4（1H）-pyrimidinone； Cambinol|NSC 112546|SIRT1 Inhibitor II|SIRT2 Inhibitor VI； SIRT1/2 Inhibitor IV
Pseurotin A （1 mg）（5S）-8S-benzoyl-2-[1S，2S-dihydroxy-3Z-hexen-1-yl]-9R-hydroxy-8-methoxy-3-methyl-1-oxa-7-azaspiro[4。4]non-2-ene-4，6-dione； NSC 348694； Pseurotin A
Adenosine 5’-triphosphate （sodium salt） （10 g）adenosine 5’-（tetrahydrogen triphosphate）， disodium salt； ATP|NSC 20268； Adenosine 5’-triphosphate （sodium salt）
L-AP4 （1 mg）2S-amino-4-phosphono-butanoic acid； L-（+）-2-amino-4-phosphorobutanoic acid|L-APB； L-AP4
Ro 25-6981 Maleate （1 mg）αR-（4-hydroxyphenyl）-βS-methyl-4-（phenylmethyl）-2Z-butenedioate-1-piperidinepropanol； Ro 25-6981 Maleate
Citicoline （sodium salt） （1 g）P’-[2-（trimethylammonio）ethyl] ester-cytidine 5’-（trihydrogen diphosphate）-inner， monosodium salt； Cytidine 5’-diphosphocholine|Flussorex|Gerolin|Logan|Neurotron|Sinkron； Citicoline （sodium salt）
D-Luciferin （sodium salt） （100 mg）4，5-dihydro-2-（6-hydroxy-2-benzothiazolyl）-4S-thiazolecarboxylic acid， monosodium salt； D-Luciferin （sodium salt）
CAY10677 （1 mg）5-（2-amino-5-pyrimidinyl）-N，N-diethyl-1-octyl-1H-indole-3-methanamine； Icmt Inhibitor 15； CAY10677
石榴红硫酸盐    1g
嗜热菌蛋白酶    25mg
双 (2- 羟乙基 ) 亚氨基三 ( 羟甲基 ) 甲烷    5g
双酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)    50 次
双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V- 荧光素 488·PI）     20 次