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腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293图片
产品简介:

腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293图片售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

产品型号:

更新时间:2017-01-05

厂商性质:经销商

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产品介绍

腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞名称 腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293图片
形态特性  上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性  我们推荐使用AAV-293细胞株繁殖腺病毒相关重组病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293细胞株,但产生的病毒滴度更高。 HEK293细胞是剪切过的腺病毒5型DNA转染的人胚肾细胞。 跟HEK293细胞一样,AAV-293细胞反式表达腺病毒E1基因,当共转染三个AAV助质粒(一个含ITR的质粒,pAAV-RC, 和E1缺失助质粒)时,可以产生有感染力的腺病毒-相关病毒颗粒。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  优质胎牛血清,10%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(10+5)
冻存条件  *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR  Amelogenin:X;CSF1PO:7,11,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

糖原Ⅲ型    500mg
陶瓷研钵 ( 直径 60 mm)    1个
陶瓷研钵 ( 直径 75 mm)    1个
天冬氨酸转氨酶    500 U
天净沙 DNA 甲基化修饰试剂盒    150 次
天净沙 Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒    20 次
天净沙 SPIA 扩增试剂盒 ( 用于扩增 DNA 模板 )    20 次
天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒    80 次
天净沙非同位素探针杂交试剂盒    5次
天净沙非同位素探针杂交试剂盒    5次
天净沙核酸浓缩剂    30mL
天净沙甲基化 PCR 2.0 试剂盒    150 次
天净沙镍柱原位再生试剂盒    20 次
天净沙通用型MLPA 试剂盒    20 次
天净沙细胞蛋白质 -RNA 双提取试剂盒     50 次
天狼猩红    5g
天门冬酰胺酶    250UAFC[7-氨基-4-三氟甲基香豆素] 荧光参照标准AFC [7-Amino-4-trifluoromethylcoumarin] Fluorescence reference standard
6-TAMRA, SE [6-羧基四甲基罗丹明,琥珀酰亚胺酯] 可标记寡核苷酸6-TAMRA, SE [6-Carboxytetramethylrhodamine, succinimidyl ester] Validated for labeling oligos
TQ3 马来酰亚胺Tide Quencher 3 maleimide [TQ3 maleimide]
5/6-TAMRA标记的Asp天冬氨酸FMOC-Asp(5/6-TAMRA)-OH
二肽酰多肽酶IV (DPPIV)荧光底物Gly-Pro-AMCGly-Pro-AMC
Pluronic F-127 20%溶液于DMSO中Pluronic F-127 20% solution in DMSO
pH荧光探针BCBCF酸BCBCF acid
5(6)-FAM氨基磷酸酯5(6)-FAM Phosphoramidite
FMOC-4,5-dehydro-L-Leu-OHFMOC-4,5-dehydro-L-Leu-OH
鬼笔环肽-iFluor 594偶联物Phalloidin-iFluor 594 Conjugate
Cyanine 3酰肼 [相当于Cy3酰肼]Cyanine 3 hydrazide [equivalent to Cy3 hydrazide]
FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMKFITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK
Cal-520 马来酰亚胺Cal-520 maleimide
2C-T-2 (hydrochloride) (50 mg)4-(ethylthio)-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride; 2,5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine; 2C-T-2 (hydrochloride)
Prostaglandin D1 (10 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxo-prost-13E-en-1-oic acid; PGD1; Prostaglandin D1
Canertinib (hydrochloride) (25 mg)N-[4-[(3-chloro-4-fluorophenyl)amino]-7-[3-(4-morpholinyl)propoxy]-6-quinazolinyl]-2-propenamide, dihydrochloride; CI 1033|PD 183805; Canertinib (hydrochloride)
2-methyl Benzamideoxime (1 g)(Z)-N’-hydroxy-2-methylbenzimidamide; 2-methyl Benzamideoxime
2-(4-Pyridyl)-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid (100 mg)4-methyl-2-(4-pyridinyl)-5-thiazolecarboxylic acid; 2-(4-Pyridyl)-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid
天然蛋白 A    1mg
甜菜碱    10g
甜菜碱溶液,5M,PCR     1.5mL
甜菜碱盐酸盐    100g
填入法 DNA 末端标记试剂盒 A    5次

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