人肝永生化细胞；THLE-3说明书采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

人肝永生化细胞；THLE-3说明书现货直销，免费快递送货上门。公司供应各种细胞株，细胞系，种类齐全，现货，质量保证，公司所有产品仅供科研使用，不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

细胞名称
形态特性  上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性  THLE-2 (ATCC CRL-10149 和 THLE-3 (ATCC CRL-11233)细胞系是正常肝细胞用SV40大T抗原转染得到。 将含有SV40 T抗原的Bgl I-Hpa I片段的逆转录病毒载体导入兼嗜性包装细胞株PA317中病毒。 THLE-2 and THLE-3表达正常成人肝上皮细胞特征性的表型。 当注射到无胸腺裸鼠中时，它们不成瘤，具有接近二倍体的核型，不表达甲胎蛋白。 THLE-2 and THLE-3将benzo[a]pyrene, N-nitrosodimet 
培养条件   Clonetics Corporation, Walkersville, MD 21793的BEGM培养基(目录号CC3170)。 套装包含了500毫升基本培养基及分别冻存的添加剂，我们不用其中的GA和Epinephrine但另外添加了5 ng/ml EGF, 70 ng/ml Phosphoethanolamine。
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件  *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
运输保存：
采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。
保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存
用途：只可用于科研。
储存：液氮。
运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基，这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。
注意：*次植入后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性，支持客户检测对应的biomarker，（如证明细胞错误，全额退款。）公司针对每株细胞，鉴定gene background，鉴定完成的细胞可以提供数据，用于证明细胞的真实性，并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。戊巴比妥钠    5g
戊二醛，25% 水溶液    10mL
戊二醛二甲钠缓冲固定液    250 mL
戊二醛磷酸缓冲固定液    250 mL
X 光片 (5×7 英寸 )    1盒
X 光片 (8×10 英寸 )    1盒
X33 酵母菌种    1mL
Xa 因子蛋白酶    25μg
Xa 因子蛋白酶    50μg
XbaI    1500U
X-Gal 干粉    0.5g
X-Gal 溶液，20mg/mL    10mL
XhoI    2000U
XL-10 gold 菌种    1mL
XL10-Gold 感受态细胞    0.1 mL×10
REV 5901 （10 mg）。alpha。-pentyl-3-（2-quinolinylmethoxy）-benzenemethanol； REV 5901
LY171883 （100 mg）1-[2-hydroxy-3-propyl-4-[4-（1H-tetrazol-5-yl）butoxy]phenyl]-ethanone； LY171883
CAY10401 （500 ug）1-oxazolo[4，5-b]pyridin-2-yl-9-octadecyn-1-one； CAY10401
Colorimetric COX Assay Potassium Hydroxide （1 ea）Potassium Hydroxide； Colorimetric COX Assay Potassium Hydroxide
L-Thiocitrulline （hydrochloride） （500 mg）N5-（aminothioxomethyl）-L-ornithine （dihydrochloride）； L-Thiocitrulline （hydrochloride）
Peroxynitrite （1 ml）peroxynitrous acid， sodium salt； Sodium Peroxynitrite； Peroxynitrite
DAN-1 EE （hydrochloride） （10 mg）4-[[（3-amino-2-naphthalenyl）amino]methyl]-benzoic acid， ethyl ester， monohydrochloride； DAN-1 EE （hydrochloride）
Prostaglandin A1 methyl ester （5 mg）15S-hydroxy-9-oxo-prosta-10，13E-dien-1-oic acid， methyl ester； PGA1 methyl ester； Prostaglandin A1 methyl ester
Prostaglandin E2-PEG11-biotin （50 ug）11α，15S-dihydroxy-9-oxo-prosta-52，13E-dien-1-oyl-polyethylene glycol 11-N’-biotinoyl-1，5-diaminopentane； PGE2-PEG11-biotin； Prostaglandin E2-PEG11-biotin
Stearoyl Serotonin （25 mg）N-[2-（5-hydroxy-1H-indol-3-yl）ethyl]-octadec*； Stearoyl Serotonin
3-Deaza-2’-deoxyadenosine （10 mg）1-（2-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl）-1H-imidazo[4，5-c]pyridin-4-amine； c3dA； 3-Deaza-2’-deoxyadenosine
AS-605240 （potassium salt） （5 mg）5-（6-quinoxalinylmethylene）-2，4-thiazolidinedione， monopotassium salt； AS-605240 （potassium salt）
XL1-Blue 化学感受态细胞    0.1mL×10
XL1-Blue 菌种    1mL
XL2-Blue 感受态细胞    10×100μL
XTT 细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒    500 次
吸附树脂 XAD7    100g