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EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1002图片
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EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1002图片售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

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更新时间:2017-01-05

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产品介绍

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1002图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1002图片
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞系来源于一无精症男性的外周血。2010年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
传代方法  1:2传代;5-6天一次
传代情况 P3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR  -
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

Beraprost (sodium salt) (5 mg)2,3,3a,8b-tetrahydro-2-hydroxy-1-(3-hydroxy-4-methyl-1-octen-6-ynyl)-1H-cyclopenta[b]benzofuran-5-butanoic acid, monosodium salt; ML 1129|Procyclin|TRK 10Beraprost (sodium salt)
Leukotriene B3 (25 ug)5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,10E-eicosatrienoic acid; LTB3; Leukotriene B3
Prostaglandin E2-d4 (5 mg)9-oxo-11α,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; Dinoprostone-d4|PGE2-d4; Prostaglandin E2-d4
5-OxoETE-d7 (50 ug)5-oxo-6E,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-6,8,9,11,12,14,15-d7 acid; 5-KETE-d7; 5-OxoETE-d7
6-trans-12-epi Leukotriene B4 (25 ug)5S,12S-dihydroxy-6E,8E,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; 5(S),12(S)-DiHETE|6-trans-12-epi LTB4; 6-trans-12-epi Leukotriene B4
13-OxoODE (100 ug)13-oxo-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13-KODE; 13-OxoODE
Sodium Acetate (500 dtn (4。1 g))Sodium Acetate
Corticosterone AChE Tracer (100 dtn)Corticosterone AChE Tracer
Latanoprost AChE Tracer (100 dtn)Latanoprost AChE Tracer
Vilogenin (carp) Standard (5 ea)Vilogenin (carp) Standard
9(S)-HpODE (100 ug)9S-hydroperoxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(S)-HpODE
Methionine Sulfoxide Positive Control (1 ea)Methionine Sulfoxide Positive Control
Sodium Acetate Stock Solution (3 M, pH 5。2) (250 mL)Sodium Acetate Stock Solution (3 M, pH 5。2)人骨髓间充质干细胞(hMSCs)
HCC38(人腺导管细胞)5×106cells/瓶×2
D/E中和琼脂/D-E中性琼脂/戴伊恩格利中和琼脂/ D/E Neutralizing Agar卫生环境中微生物的分离培养, 消毒效果测定250克国产/进口
FaDu(人咽鳞细胞)5×106cells/瓶×2
GST标签蛋白裂解液20 ug20μg、100μg
小鼠胰腺星状细胞*培养基100mL
BRL-3A(大鼠正常肝细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肺成纤维细胞*培养基100mL
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒规格:500次
人小气道上细胞*培养基100mL
KORSER氏枸橼酸盐肉汤/KORSER氏柠檬酸盐肉汤/Korser Citrate Sodium Broth用于细菌的枸橼酸盐试验100克国产/进口
人内脏脂肪细胞*培养基100mL
标准Ⅱ号营养琼脂/标准2号营养琼脂/Standard Ⅱ Nutrient Agar不含糖,可作血琼脂基础和传代用250克国产/进口
人成纤维肉瘤细胞英文名称:HT1080
聚蛋白胨/多聚蛋白胨/多价蛋白胨/PolypeptoneBR250/500/1000克国产/进口
大鼠小肠平滑肌细胞*培养基100mL
禽胆盐/Bile salt from poultryBR25克国产/进口
Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2
氧化发酵试验培养基/OF培养基/Hugh-Leifson培养基/HLGB细菌的氧化发酵试验250克国产/进口
SF763(人脑瘤细胞)5×106cells/瓶×2
PAF C-16 (5 mg)1-O-hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Plaet-activating Factor C-16; PAF C-16

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