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更新时间:2017-01-11
厂商性质:经销商
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小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)图片
形态特性 圆形
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%HS
传代方法 1:3传代;3~4天1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)图片细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)图片质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)图片操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
23-0390-10Leptomycin B( 出核转运抑制剂 )10μg
3672-50植物 DNAout50 次
RNA CTAB ( 十六烷基*基溴化铵 )100g
Cre 重组酶50U
dNTP 溶液,100mM 0.5mL
0.5mLDNA 离心超滤管 (300-500 KD)1个
130596-200荧光染色细胞凋亡检测试剂盒200 次
130514-2硅基磁珠2mL
SG1117 菌种1mL
DH10B 感受态细胞0.1 mL×10
DNA 快速连接试剂盒100 次
GAL 指示剂培养基100mL
CAS596-09-8二荧光素1g
140653-1亲和层析柱50 mL
真菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次
邻硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷1g
2.0 mL RNase-free 离心管500 支
Cycloheximide50mg
Southern Marker Oligo(DIG)20 次
130301-150天净沙 DNA 甲基化修饰试剂盒150 次
120674-50酪蛋白50g
人腮腺炎毒IgG ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人免疫球蛋白重链可变区(IgHV)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗着丝点抗体(ACA/CENP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗Sa抗体(anti-Sa-Ab)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人甲状腺非肽激素抗体(THAA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人红细胞生成素(EPO)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人多肽YY(Peptide-YY)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人单纯疱疹毒(HSV)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)图片人补体3裂解产物(C3SP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人白介素受体相关激酶(IRAK)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人β内啡肽(β-EP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
犬瘤坏死因子α (TNF-α)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装