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小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY图片
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小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY图片售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

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更新时间:2017-01-11

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产品介绍

小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞名称 小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY图片
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞来自骨髓瘤细胞系 NS-1;由于次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT、HGPRT)和腺嘌呤磷酸核糖转移酶(APRT)缺陷导致该细胞对腺苷和鸟嘌呤的类似物抵抗。在氨基蝶呤、腺嘌呤和胸腺嘧啶存在的条件下,当该细胞作为永生化细胞与Rb(8.12)易位的雌性小鼠的B细胞融合时,会产生Ig重链基因位点的阳性选择;Ig重链基因的选择可使杂交瘤细胞更稳定地合成抗体。该细胞鼠痘病毒阴性。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法  维持细胞浓度在2×105~1×106 cells/ml之间;2~3天换液1次。
传代情况 C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR  -
同工酶 
染色体  50~60
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

胰凝乳蛋白酶,测序25μg
CAS12650-88-3溶菌酶1g
130542-0.1水蛭素溶液,2mg/mL0.1mL
柱式毛发 DNAout50 次
mRNA 提取试剂盒25 次
ATP 酶测试盒 ( 组织及细胞膜不需高速离心 )50 T
植物 DNAout50 次
Rosetta-gami(DE3)plysS 菌种1mL
130659-10000三磷酸苷双磷酸酶10,000 milli U
80206-50两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次
Western 印迹膜抗体清除剂50mL
过氧化氢酶 ( 牛肝 )1g
D- 果糖250g
Zetterqvist 固定液250 mL
CAS9005-67-8吐温 -60500mL
19-0080-500 F12K 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )500mL
130979-50柱式血清血浆 DNAout50 次
琼脂糖100g
D/F12 培养基100mL
大提柱式细菌 RNAout5次
Bst DNA 聚合酶,全长500U
CAS134-58-78- 氮杂鸟嘌呤1Vial小鼠腺毒(ADV)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠促甲状腺素(TSH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠4羟基壬烯酸(4-HNE)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
兔子促黄体激素(LH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
兔内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人组胺(HIS)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人纤维介素蛋白(fgl2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人唾液酸(SA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装

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