tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞（B类）；Pan02-CAG-tTA-3E6说明书采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞（B类）；Pan02-CAG-tTA-3E6说明书现货直销，免费快递送货上门。公司供应各种细胞株，细胞系，种类齐全，现货，质量保证，公司所有产品仅供科研使用，不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

细胞名称
形态特性  多角
生长特性 贴壁生长
特征特性  转染pCAG-tTA质粒，经2.0ug/ml puromycin筛选，为Tet-off稳定调控细胞系，受强力霉素Dox调控倍数在20~50倍。细胞倍增时间为24小时。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  5%FBS + 2.0ug/ml puromycin
传代方法  1:4传代，2~3天传代一次。
传代情况 
冻存条件  基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  -
同工酶 
染色体 
使用权限 B类
运输保存：
采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。
保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存
用途：只可用于科研。
储存：液氮。
运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基，这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。
注意：*次植入后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性，支持客户检测对应的biomarker，（如证明细胞错误，全额退款。）公司针对每株细胞，鉴定gene background，鉴定完成的细胞可以提供数据，用于证明细胞的真实性，并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。PB-22 RM （1 mg）QUPIC； 1-pentyl-8-quinolinyl ester-1H-indole-3-carboxylic acid
GNE 7915 （5 mg）[4-[[4-（ethylamino）-5-（trifluoromethyl）-2-pyrimidinyl]amino]-2-fluoro-5-methoxyphenyl]-4-morpholinyl-methanone
4-[[5-氨基-1-（2，6-二氟苯甲酰基）-1H-1，2，4-三唑-3-基]氨基]苯磺酰胺Aurora A Inhibitor I （5 mg）
生物素标记组蛋白H3多肽（氨基酸：1-21）Biotinylated Histone H3 Peptide （residues 1-21） （200 ul）
Ac-LEVD-AFC， Caspase-4荧光底物Caspase-4 Substrate LEVD-AFC
Ascotoxin， BFA， Cyanein， Decumbin， γ，4-Dihydroxy-2-（6-hydroxy-1-heptenyl）-4-cyclopentanecrotonic acid λ-lactoneBrefeldin A
GW-57201， Tykerb， TyverbLapatinib Ditosylate （Tykerb， Tyverb， GW-572016）
NSC-250682Oridonin
NP-40NP-40 （10% in H
Indole 3-propionamideIPAM
N-Salermide
5-[1，2-Dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene）methyl]-2，4-dimethyl-1H-pyrrole-3-propanoic acidSU 6668
Polyethylene glycol sorbitan monolaurate， Polyoxyethylenesorbitan monolaurateTween 20， MegaPure Detergent， 10% Solution
α-Toluenesulfonyl fluoride， Benzylsulfonyl fluoride， Phenylmethylsulfonyl fluoridePMSF
3-[（Decahydro-1α，2β，4aβ-trimethyl-5-methylene-1-naphthyl）methyl]-2-hydroxy-5-methoxybenzoquinone； IQIlimaquinone
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