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更新时间:2017-01-11
厂商性质:经销商
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小鼠纤维肉瘤细胞;WEHI-13VAR图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠纤维肉瘤细胞;WEHI-13VAR图片
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁及悬浮生长
特征特性 在放线菌素D存在下对TNF敏感
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 新生牛血清,10%
传代方法 1:4-1:6
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
(2R,3R,4S,5R)-5-(6-amino-2-chloro-9H-purin-9-yl)-4-fluoro-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-olClofarabine
2H-Pyrido[1’,2’:4,5]pyrazino[2,1-b][1,3]oxazine-9-carboxamide, N-[(2,4-difluorophenyl)methyl]-3,4,6,8,12,12a-hexahydro-7-hydroxy-4-methyl-6,8-dioxo-, (4R,12aS)-GSK1349572
(2R,3R,4R,5S)-1-(2-Hydroxyethyl)-2-(-(hydroxymethyl)piperidine-3,4,5-triol; N-(2-Hydroxyethyl)-1-deoxynojirimycin; BAY-1099Miglitol
(S)-4-methyl-N-((S)-1-((S)-4-methyl-1-((R)-2-methyloxiran-2-yl)-1-oxopentan-2-ylamino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl)-2-((S)-2-(2-morpholinoacetamido)-4-phenylbutanamido)pent*; PR-171Carfilzomib
1-Daminozide
4-[[4-Oxo-2-thioxo-3-[3-trifluoromethyl)phenyl]-5-thiazolidinylidene]methyl]benzoic acid; CFTR(inh)-172CFTR Inhibitor-172
2-Amino-8-ethyl-4-methyl-6-(lH-pyrazol-5-yl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one; SAR245409XL765
(S)-N-(4-(2-((4-morpholinophenyl)amino)pyrimidin-4-yl)phenyl)pyrrolidine-2-carboxamideXL019
2,3,4,5-Tetrahydro-7-hydroxy-1H-benzofuro[2,3-c]azepin-1-oneCID-755673
(2R,Phleomycin
Annexin V-PE-Cy5 ReagentAnnexin V-PE-Cy5 Reagent
Protein A-AgaroseHi-Bind Protein A-AgaroseHGACL-009Hs578T人乳腺癌细胞1×1061ml/T751050 元
HRCL-005HLF-a人肺细胞1×1061ml/T751500 元
EMCL-002UMNSAH/DF-1鸡胚成纤维细胞1×1061ml/T751400 元
HEMCL-015HFTF人胚胎眼Tenon囊成纤维细胞1×1061ml/T751500 元
HICL-001TE353.SK人正常皮肤细胞1×1061ml/T751500 元
HIMCL-056KG-1a人急性骨髓白血病细胞1×1061ml/T751400 元
HRCL-015NCI-H2227人小细胞肺癌细胞1×1061ml/T751500 元
ICL-002GP-S2豚鼠皮质细胞1×1061ml/T751500 元
ICL-037TS-ES-1树鼩胎皮成纤维样细胞1×1061ml/T751500 元
MIMCL-012P388D1(IL-1)小鼠淋巴瘤细胞1×1061ml/T751000 元
RCL-022OAR-L1绵羊肺细胞1×1061ml/T751200 元
UCL-028CRFK猫肾细胞1×1061ml/T751400 元
点击人脑动脉血管内皮细胞培养试剂盒人脑动脉血管内皮细胞培养试剂盒试剂盒试剂盒元
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