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杂交瘤细胞;A375sci*
产品简介:

杂交瘤细胞;A375sci*采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

产品型号:

更新时间:2025-06-05

厂商性质:经销商

访问量:261

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产品介绍

杂交瘤细胞;A375sci*质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。

杂交瘤细胞;A375sci*操作步骤:

1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞名称
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性  该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法  1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

pBS KS(+)
pCB4
pcDNA6.2/C-YFP-DEST(pcDNA6.2CYFPDEST)
pCMV-dR8.2 dvpr(pCMVdR8.2dvpr)
pCMV6-AN-His-HA(pCMV6ANHisHA)
pCW-Cas9(pCWCas9)(60908-2378)
pDONR223
pEF1/V5 His C(pEF1V5HisC)
pET-24b(+)(pET24b)(60908-2788)
pET-GST(pETGST)(60908-2768)
pFA6a-3HA-TRP1(pFA6a3HATRP1)
pFlag-CMV-1(pFlagCMV1)
pGEM-3z/626(pGEM3z626)
pGL4.31[luc2P GAL4UAS Hygro]
pHcRed1
pHT304(60908-4160)
pIRES2-EGFP(pIRES2EGFP)(60908-4260)y
pJW2
pLenti CMV/TO DEST (pLentiCMVTODEST)(775-1)
pLIC-CH
pLVX-Hom-Nuc1(pLVXHomNuc1)FLASH/CASP8AP2  半胱氨酸蛋白酶8相关蛋白2抗体规格: 0.1ml
Properdin  P因子/备解素抗体规格: 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的羊抗豚鼠IgG规格: 0.1ml
Phospho-FAK/PTK2(Tyr397)  磷酸化粘着斑激酶抗体规格: 0.1ml
FAM59B  FAM59B蛋白抗体规格: 0.2ml
Goat Anti-Bovine IgG/PE  PE标记的羊抗牛IgG规格: 0.1ml
phospho-MEK1/MAP2K1(Thr292)  磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体规格: 0.1ml
CCDC46  卷曲螺旋结构域蛋白46抗体规格: 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgM  兔抗马IgM规格: 1mg
phospho-EGFR (Thr678)  磷酸化表皮生因子受体抗体规格: 0.1ml
beta-Amyloid(25-35)  β淀粉样肽(25-35)抗体规格: 0.1ml
XRCC1  X射线修复交叉互补蛋白抗体规格: 0.1ml
DPPA2/PESCRG1  多能发育相关基因2抗体规格: 0.1ml
ABHD13  水解酶结构域蛋白13抗体规格: 0.2ml
ULBP2/N2DL2  UL16结合蛋白2抗体规格: 0.2ml
DCIR/CLEC4A  C型凝集素结构域家族4成员A抗体规格: 0.2ml
katanin p80  剑蛋白p80抗体规格: 0.2ml
Transferrin  转铁蛋白抗体规格: 0.1ml
Cyclin B1  周期素B1抗体规格: 0.1ml
RACGAP1  Rho GTP酶激活蛋白GAP抗体规格: 0.2ml
TGF beta R2/TGFBR2  转移生因子β受体2抗体(TGF-βRⅡ)规格: 0.2ml

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