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更新时间:2025-07-18
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小鼠杂交瘤细胞NC-4D12图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞NC-4D12图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
羟基脲 1g
嗜热菌蛋白酶 25mg
CAS10034-99-8 硫酸镁七水 100g
100835-1 胃蛋白酶抑制剂溶液,1 mg/mL 1mL
柱式凝固血液 DNAout 50 次
马来酸 100g
ATP 溶液,1mM 1mL
DNA 上样液 ( 红 ),6× 10mL
JM83 菌种 1mL
60609-200 T4 DNA 连接酶 200U
91202-50 双酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq) 50 次
Wortmannin(PI3K 抑制剂 ) 0.5mg
H-89(PKA 抑制剂 ) 1mg
L- 天门冬酰胺 25g
多聚甲醛 - 氢氧化固定液 250 mL
CAS21931-53-3 尿苷 -5'- 二磷酸 25mg
19-0110-500 IMDM 培养基 ( 含 1% 双抗 ) 500mL
130930-10 百万碱基血液 DNAout 10 次
秋水仙素 100mg
DAB 法生物素杂交试剂盒 5次 CHO-K1(仓鼠卵巢细胞亚株)5×106cells/瓶×2
FLAG标签免疫亲和介质125ul国产
小鼠视网膜色素上细胞*培养基100mL
BC-021(人腺细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肠粘膜上细胞*培养基100mL
7.5% NaHCO3溶液规格:100ml
人胎盘滋养层细胞*培养基100mL
McCown Woody Plant Vit Mix(Modified)BR100毫升国产/进口
人卵巢紫杉醇耐药株英文名称:A2780/Taxol
醋酸铅培养基/乙酸铅培养基/Lead Acetate Medium用于细菌的硫化氢试验250克国产/进口
前列腺英文名称:LNCaP
蜡样芽孢杆菌计数显色培养基250克国产/进口
大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(未分化)英文名称:PC-12(未分化)
肉浸液肉汤培养基/肉浸液肉汤/Meat Infusion Broth溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养250克国产/进口
V79(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2
胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂/胰酶大豆酵母浸膏琼脂/TSA-YE/TSYEA用于单核细胞和李斯特氏菌的分离培养250克国产/进口
RSC, 大鼠雪旺细胞