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小鼠正常食管上皮细胞;MNEEC/HL-009图片
产品简介:

小鼠正常食管上皮细胞;MNEEC/HL-009图片售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

产品型号:

更新时间:2017-01-23

厂商性质:经销商

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产品介绍

小鼠正常食管上皮细胞;MNEEC/HL-009图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称 小鼠正常食管上皮细胞;MNEEC/HL-009图片
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法  1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 未定

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

GBP5/Guanylate binding protein 5  鸟嘌呤核苷酸结合蛋白5抗体规格: 0.2ml
RIP2  受体结合丝氨酸苏氨酸激酶2抗体规格: 0.2ml
CD31/PECAM-1  血小板内皮细胞黏附分子-1抗体规格: 0.1ml
BMP9  骨形态发生蛋白9抗体规格: 0.2ml
Phospho-PTEN(Ser385)  磷酸化瘤抑制基因PTEN抗体规格: 0.1ml
CCR10  细胞表面趋化因子受体10抗体规格: 0.1ml
MAGEA10  黑色素瘤相关抗原10抗体规格: 0.2ml
PPIL1  亲环素相关蛋白1抗体规格: 0.2ml
Caspase-6 (NT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(N端)规格: 0.1ml
PNPLA6/NTE  含patatin样磷脂酶6抗体规格: 0.1ml
PI 3 Kinase p85 beta  磷脂酰肌醇激酶p85β抗体规格: 0.1ml
phospho-B-Raf (Ser446)  磷酸化B-Raf抗体规格: 0.1ml
Destrin 19/ADF  肌动蛋白解聚因子19抗体规格: 0.1ml
Phospho-PDGFRA(Tyr1018)  磷酸化血小板源性生因子受体-α抗体规格: 0.1ml
phospho-SCNN1B(Ser633)   磷酸化上皮钠通道β2抗体规格: 0.1ml
FAM129A/Cell growth inhibiting gene 39 protein  细胞生抑制基因39蛋白抗体规格: 0.2ml
Phospho-p90RSK(Ser380)  磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体规格: 0.1ml总测试盒 / 总脂酶测试盒    24T    18-0780-24
Denhardt 溶液,50×    100mL    91104A-100
200U        Therminator γ DNA 聚合酶
15 次        非酶 DNA 清除剂 -2
1g        L- 谷胱甘肽 ( 氧化型 )
100 次        植物种属鉴定 PCR Mix 7
氯化    100g    CAS7447-40-7
增强型 DAB 显色试剂盒    100mL    81223-100
大提柱式 DNA 清除剂    5次    90802-5
5μg        Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL
50mg        Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除剂 )
10mL        一步式广谱 DNAout
50mL        SP 交换介质
生物素化蛋白 L    0.5mg    131101-0.5
接头 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)    5nmol    130987C-5
200mL        小鼠白细胞分离液 1.093
50 次        即用型多重 PCR 试剂盒
100mg        5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷

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