杂交瘤细胞株；1B3说明书采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

杂交瘤细胞株；1B3说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称 杂交瘤细胞株；1B3说明书
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法  1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 未定

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

Rabbit Anti-human IgG/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗人IgG规格: 0.1ml
Phospho-HER2(Tyr1112)  磷酸化HER2受体抗体规格: 0.1ml
DVL2  蓬乱蛋白2抗体规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/PE  PE标记的兔抗羊IgG规格: 0.1ml
phospho-GSK3 Alpha/Beta(Tyr279+Tyr216)  磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗体规格: 0.1ml
Salmonella enteritidis H  伤寒沙门氏菌鞭毛抗原H抗体规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗牛IgG 规格: 0.1ml
HBEX2/Bex1  脑组织表达X连锁蛋白1抗体规格: 0.2ml
ELL  聚合酶延伸因子抗体规格: 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的小鼠抗牛IgG规格: 0.1ml
NFEM5/IRF4/MUM1  淋巴细胞特异性干扰素调节因子抗体规格: 0.2ml
HEBP2  Heme结合蛋白2抗体规格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的小鼠抗人IgM规格: 0.1ml
FRA2/FOSL2  FRA2/FOSL2抗体规格: 0.1ml
SRXN1  硫氧还蛋白1抗体规格: 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗兔IgG规格: 0.1ml
FAS/Apo-1/CD95  载脂蛋白A1抗体规格: 0.1ml
FRMD4B  FRMD4B蛋白抗体规格: 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgG  兔抗鸡IgG规格: 1mg
eIF3A  真核翻译起始因子3A抗体规格: 0.1ml
beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉样肽1-40(C端)抗体规格: 0.1ml
Melamine  三聚氰胺抗体规格: 0.2ml
Nadrin  神经细胞发育相关调控蛋白抗体规格: 0.2ml2000U        XhoI
天冬氨酸转氨酶    500 U    CAS9000-97-9
HRP 标记内参抗体 (β-actin)    20μL    130592-20
动物 RNAout(TRIzol)     250mL    3070-250
50 次        膜结合 DNA 清除试剂盒
25 OD        3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物
5mL        角质细胞生长因子 - 不含 BPE
250mg        潮 B 干粉
卵巢上皮细胞生长因子    5mL    21-0210-5 
RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%    100mL    100890-100
1mL        PCR 抑制物清除剂
1个        暗盒 (5×7 英寸 )
1mg        H-89(PKA 抑制剂 )
10g        RNA  DTT ( 二硫代苏糖醇 )
Insulin    18mg    23-0330-18
柱式粪便 DNAout    50 次    80102-50
100mL        RIPA 裂解液 ( 强 )
10 次        ConA 糖蛋白分离试剂盒
50 次        DNA 电泳分子量标准 (3)λ/EcoR I+ Hind III
100mL        MAL 指示剂培养基
荧光胺    25mg    CAS38183-12-9
亲和层析柱    30 mL    140652-1
100 次        真菌种属鉴定 PCR Mix 1
1g        邻联茴香胺
1g        2,6- 二氯酚靛酚
50mg        Cisplatin(DNA 交联剂 / 细胞凋亡诱导剂 )