添加QQ号
3004901493
产品型号:
更新时间:2017-01-20
厂商性质:经销商
访问量:372
021-39596320
相关文章
杂交瘤细胞株;1C4F6价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
杂交瘤细胞株;1C4F6价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
1次 一步法 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )
10×100μL JM110 感受态细胞
1g 鱼精蛋白硫
200mL 乙烯乙二醇
L- 羟基脯氨酸 5g CAS51-35-4
硫酸链溶液 ,50mg/mL 10mL 60210-10
100mL 印迹膜抗体稀释液
250g 聚乙二醇 8000
1g 次黄嘌呤
1000U MMLV 逆转录酶 (H-)
青 G 盐 1g CAS69-57-8
牛血清白蛋白标准品,2mg/mL 1mL 131070-1
1mg 重组蛋白 G
1mL LBA4404 农杆菌菌种
1000U 葡萄糖 -6- 磷酸脱氢酶
50 次 双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 555·7-AAD)
3- 三 ( 羟甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸 10g CAS29915-38-6
考马斯亮蓝 G-250 染液 250mL 80812-250
5g α- 酮戊二酸
1g 氯化血红素
2mg 抑肽酶
48 T 碱性磷酸酶测试剂盒
酪氨酸脱羧酶 25U CAS9002-09-9NIS 钠碘转运体蛋白抗体规格: 0.2ml
Junctophilin 3 连接蛋白JPH3抗体规格: 0.2ml
GRAP2 生因子受体结合蛋白2相关接蛋白2抗体规格: 0.2ml
NCOA3/KAT13B/AIB1/SRC-3 类固醇受体激活蛋白3抗体规格: 0.2ml
COX6B 细胞色素C氧化酶亚基6B抗体规格: 0.2ml
Nicastrin 老年性痴呆蛋白APH2抗体规格: 0.1ml
Phospho-Mre11 (Ser676) 磷酸化DNA损伤关键蛋白Mre11抗体规格: 0.1ml
C11orf21 11号染色体开放阅读框21抗体规格: 0.2ml
Metallothionein 3 金属硫蛋白3抗体规格: 0.2ml
MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus) 多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体规格: 0.1ml
GDN/SERPINE2 胶质源性连接蛋白抗体规格: 0.2ml
ADAM9 去整合素样金属蛋白酶9抗体 0.2ml
MAP3K7IP3 NFKB激活蛋白1抗体规格: 0.1ml
Brd4/CAP 染色体相关蛋白CAP抗体规格: 0.2ml
phospho-SYN1(Ser549) 磷酸化神经突触素1抗体 0.1ml
LFABP/FABP-1 肝脏型脂肪酸结合蛋白抗体规格: 0.2ml
DENND2D MAP激酶激活死亡域蛋白2D抗体规格: 0.2ml
plant lectin B4/IB4 植物凝集素IB4 0.2ml
KLK15 激肽释放酶15抗体规格: 0.2ml
PITX2 成对样同源结构域转录因子2抗体规格: 0.2ml