杂交瘤细胞株；WV-Vi-01说明书采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

杂交瘤细胞株；WV-Vi-01说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称 杂交瘤细胞株；WV-Vi-01说明书
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法  1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 未定

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

G protein beta subunit like  G蛋白β样蛋白抗体规格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG  兔抗人IgG规格: 1mg
Phospho-ELk1 (Ser389)  磷酸化细胞转录因子ELK1抗体规格: 0.1ml
AGFG1  艾滋病病毒复制结合蛋白抗体规格: 0.2ml
Klotho  Klotho多肽蛋白抗体规格: 0.1ml
E2F2  转录因子E2F-2抗体规格: 0.1ml
BEX4  脑表达X连锁蛋白4抗体规格: 0.2ml
VEGF-A/VEGF 165  血管内皮生因子A抗体规格: 0.1ml
DDX4/MVH  DDX4抗体规格: 0.1ml
TRIM29/ATDC  共济失调毛细血管扩张症D相关蛋白抗体规格: 0.2ml
TSHB(2T11)  促甲状腺素单克隆抗体规格: 0.1ml
CYLD  微管结合蛋白CYLD抗体规格: 0.1ml
DUSP13  双特异性磷酸酶13抗体规格: 0.2ml
Tat  细胞酪氨酸转氨酶抗体规格: 0.2ml
CNTF  睫状神经营养因子抗体规格: 0.1ml
B3GALNT1  β1，3半糖转移酶3抗体规格: 0.2ml
SRG11/Spata17  睾凋亡基因抗体规格: 0.1ml
C-jun/AP-1  原基因蛋白/活化蛋白1抗体规格: 0.1ml
SERPINA12/Vaspin  内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制蛋白抗体规格: 0.2ml
SLC16A3/MCT4  单羧酸转运蛋白3/4抗体规格: 0.2ml
LGALS3BP  可溶性半糖凝集素3结合蛋白抗体规格: 0.2ml
Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD  核仁蛋白3抗体规格: 0.2ml
SATB1  核基质结合区结合蛋白1抗体规格: 0.1ml
CD54/ICAM-1  细胞间粘附分子-1抗体规格: 0.1ml25mg        多聚 -L- 赖氨酸 (15-30 万 )
100g        RNA  GuSCN( 异硫氰酸胍 )
50U        尿嘧啶切刻酶
Northern 杂交技术服务    1 张膜    R003-1
ATP 溶液，100mM    0.25mL    120625-0.25
100mg        胃粘膜素
5g        Glucosamine( 胰岛素抵抗诱导剂 )
500g        铁氰化
25 次        miRNA cDNA *链合成试剂盒
酪蛋白    50g    CAS9000-71-9
DB3.1 感受态细胞    10×100μL    140218-10
200mL        小鼠淋巴细胞分离液 1.092
10mg        Hydroxystilbamidine 
5g        嘌呤硫
25 次        miRNA 荧光定量检测试剂盒
去离子甲酰胺    100mL    CAS75-12-7
通用 miRNA 克隆接头    0.83nmol    130681-0.83
20 次        一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )
1g        甲基绿
25g        异硫氰酸胍
5mL        色素细胞生长因子
100g        DNA  SDS( 十二烷基硫酸 )
细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-APC）    20 次    140626-20
大片段 DNA 分子量标准    50μg    90101-50