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小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 L929说明书
产品简介:

小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]说明书采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

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更新时间:2017-01-20

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产品介绍

小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]说明书【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]说明书
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  亲本L的亚克隆,是zui早建立的连续培养物之一,L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。APRT+,HPRT+。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
传代方法  1:3传代;3-4天一次
传代情况 PN3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR  -
同工酶 
染色体  56-68
使用权限 A类

小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]说明书细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]说明书质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]说明书操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

大鼠淋巴细胞试剂盒规格型号:96T/48T大鼠淋巴细胞试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:大鼠淋巴细胞试剂盒、大鼠淋巴细胞eisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
大鼠活化A受体抗体试剂盒规格型号:96T/48T大鼠活化A受体抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:大鼠活化A受体抗体试剂盒、大鼠活化A受体抗体eisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
大鼠抗平滑肌抗体试剂盒规格型号:96T/48T大鼠抗平滑肌抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:大鼠抗平滑肌抗体试剂盒、大鼠抗平滑肌抗体eisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
大鼠叠氮胸苷试剂盒规格型号:96T/48T大鼠叠氮胸苷试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:大鼠叠氮胸苷试剂盒、大鼠叠氮胸苷eisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
大鼠单核细胞趋化1试剂盒规格型号:96T/48T大鼠单核细胞趋化1试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:大鼠单核细胞趋化1试剂盒、大鼠单核细胞趋化1eisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
大鼠叉头P3试剂盒规格型号:96T/48T大鼠叉头P3试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:大鼠叉头P3试剂盒、大鼠叉头P3eisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。5(6)-TRITC    10mg    22-0020-10
10 μL RNase-free 白吸头 ( 袋装带芯长尖 )    1000 支    17-007-1000
1mL        Protein G 琼脂糖
100mL        Bradford 法蛋白定量试剂盒
100μL        Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )
5次        植物线粒体纯化试剂盒 ( 精提 )
Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活剂 )     1mg    23-0600-1
玻璃珠法柱式酵母 DNAout    50 次    130992-50
400U        RNase 抑制剂 ( 人源 )
100mL        超杂交液 A(不含甲酰胺)
1g        盐酸四环素干粉
1mL        环孢 A 溶液 ,10mg/mL
ONPG 溶液,10mg/mL    10mL    131185-10
DNA  CTAB 溶液,20%    100mL    101107-100
10 次        Southern 植物 DNAout 
小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]说明书100mL        DMEM 培养基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 )
50 次        柱式真菌 DNAout
1mL        ER2566 菌种
克必隆 eTS 细菌基因组差减杂交试剂盒    7次    130410-7
96 孔板 PCR 片段纯化回收试剂盒 ( 离心法 )    1次    80919-1
25g        水杨酸
200mL        大鼠中性粒细胞分离液 1.091

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