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更新时间:2017-01-23
厂商性质:经销商
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中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 CHO-HCV-E2细胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因,能稳定表达E2蛋白,是HCV基础研究的*摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士构建于2008年并保存。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C19
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
桂皮醛 分子式: 132.16 分子量: C9H8O 英文名称: Cinnamaldehyde CAS号: 14371-10-9
左旋千金藤啶碱 分子式: 327.37434 分子量: C19H21NO4 英文名称: L-stepholidine CAS号: 16562-13-3
Hanks’ Balanced Salts 分子式: 分子量: 英文名称: Hanks equilibrium salt CAS号: N#A2968
酸性蓝 分子式: 566.66 分子量: C27H31N2NaO6S2 英文名称: Acid blue CAS号: 116-95-0
氯化硝基四氮唑蓝(NBT) 分子式: 817.6 分子量: C40H30N10O6 · 2 英文名称: Nitro blue tetrazolium chloride (NBT) CAS号: 298-83-9
溴酚蓝 分子式: 669.96 分子量: C19H10Br4O5S 英文名称: Bromine phenol blue CAS号: 115-39-9
1,1-DICYCLOPROPYLBENZENEMETHANOL 分子式: 188.27 分子量: C13H16O 英文名称: 1,1-DICYCLOPROPYLBENZENEMETHANOL CAS号: 5689-19-0
头孢拉定 分子式: 349.41 分子量: C16H19N3O4S 英文名称: Setting of the CAS号: 38821-53-3
硫化剂HVA-2(PDM) 分子式: 268.23 分子量: C14H8N2O4 英文名称: HVA-2 (PDM) CAS号: 3006-93-7
亚硝基红盐 分子式: 377.26 分子量: C10H5NNa2O8S2;ONC1 英文名称: Nitroso R salt CAS号: 525-05-3
茜素 分子式: 240.21 分子量: C14H8O4 英文名称: Alizarin CAS号: 72-48-0 一站式植物 mRNAout 81028-25 25 次
10mL 镍柱介质
100μL Ac-DEVD-CHO(Caspase3 抑制剂 )
10mg Hydroxystilbamidine
30 次 通用型全基因组扩增试剂盒
JC-1 22-0410-1 1mg
土壤腐殖酸清除剂 70603-100 100mL
120mL 气相 RNase 清除剂
150mL 丙烯葡聚糖凝胶 S-100 HR
100mL 动物 RNAout(TRIzol)
500U Dam 甲基转移酶
人内皮细胞分离液 1.060 120901-200 200mL
柱式病毒 DNAout 70701-50 50 次
200μL ROX 参考染料
250mg 赤
100mL RNase-free ,3M,pH 5.2
200mL 人淋巴细胞分离液 1.077(FICOLL 配置 )
过氧化氢定量分析试剂盒 ( 脂兼容性 ) 18-0330-250 250 T
TAE 电泳液 ,50× 100211-250 250mL
5g 伞形酮
100mL DNA CTAB 溶液,20%
50 次 柱式 OLIGO 回收试剂盒
1mL Rosetta-gami B(DE3)plysS 种
WarmStart Bst DNA 聚合酶 131162-1600 1600U
电泳过硫酸铵 100879-1 0.1gx10