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更新时间:2017-01-23
厂商性质:经销商
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中国仓鼠肺细胞;CHL价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
中国仓鼠肺细胞;CHL价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雌性中国仓鼠的肺组织。1970年由Koyama 等建立。广泛应用于化学物质诱导的染色体畸变检测。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
传代方法 1:3传代;3-4天一次
传代情况 PN5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体 25-29;27
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
考马斯亮蓝G250 分子式: 854.02 分子量: C47H48N3NaO7S2 英文名称: Kaumas blue G250 CAS号: 6104-58-1
1,2,3,5-四氯苯 分子式: 215.89 分子量: C6H2Cl4 英文名称: 1,2,3,5- four CAS号: 634-90-2
氨苄青霉素 分子式: 403.45 分子量: C16H25N3O7S 英文名称: Ampicillin CAS号: 7177-48-2
OP乳化剂 分子式: 324.41192 分子量: C18H28O5 英文名称: OP emulsifier CAS号: 9002-93-1
硫代米氏酮 分子式: 284.42 分子量: C17H20N2S 英文名称: TMK CAS号: 1226-46-6
亮绿 分子式: 792.84 分子量: C37H34N2Na2O9S3 英文名称: Bright green CAS号: 633-03-4
8-氨基萘-1,6-二磺酸 分子式: 303.31 分子量: C10H9NO6S2 英文名称: 8- two sulfonic acid CAS号: 129-91-9
铅试剂 分子式: 256.33 分子量: C13H12N4S; C6H5NHNHCSN= 英文名称: Lead reagent CAS号: 1960/10/6
邻苯二甲酸 分子式: 166.13 分子量: C8H6O4 英文名称: Two formic acid CAS号: 88-99-3
1,2-二氯丙烯 分子式: 110.97 分子量: C3H4Cl2 英文名称: 1,2- two chloride CAS号: 563-54-21mL XL1-Blue 种
1g 肝素
5g 氯化铵 T
10 次 柱式植物 mtDNAout,测序
磷酸肌酸二盐 CAS19333-65-4 10mg
C41(DE3) 种 12-227 1mL
50 次 血液 RNAout
10mL 红溶液 ,100mg/mL
1g 5- 磷酸吡哆醛,一水
50 次 SDS-PAGE 样品制备试剂盒
L- 谷氨酸 CAS6106-04-3 25g
YPDG 液体培养基 130897-100 100mL
500g 胰蛋白胨
1g 胶原蛋白Ⅰ型
100mL 交联琼脂糖凝胶 6B
0.1mg 山羊抗兔 IgG,荧光素 488 标记
1- 萘胺 CAS134-32-7 5g
小鼠抗 GFP 标签单抗 130580-100 100μL
100g 植物凝胶
25g L- 精氨酸
5g #NAME?
500g 脑心浸液
葡聚糖凝胶 LH-20 CAS9041-37-6 25g
SDS-PAGE 浓缩胶配胶液 100867-500 500mL