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SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1说明书
产品简介:

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1说明书售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

产品型号:

更新时间:2017-01-23

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产品介绍

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1说明书【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1说明书
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞源自CV-1细胞株,经转染编码野生型T抗原、起始点缺陷突变的SV40得到;细胞中整合有SV40基因组完整早期区段的单个拷贝。该细胞表达T抗原,适用于需要SV40T抗原表达的载体的转染;保留SV40溶细胞性生长的特性;支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制;支持早期区段缺失的SV40纯体的复制。因含有SV40的DNA序列,该细胞需要在2级生物安全柜中操作。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
传代方法  1:3传代;3-4天一次
传代情况 PN2
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR  -
同工酶 
染色体  99-110
使用权限 A类

 

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人绒毛膜间充质基质细胞
大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) Rattus
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
侧孢芽胞杆菌 Bacillus laterosporus
小鼠晶状体上皮细胞*培养基100mL
瓦克青霉 Penicillium waksmanii
香菇 Lentinula edodes
BGC823(人胃细胞)5×106cells/瓶×2
都柏林沙门氏菌 Salmonella dublin
根瘤菌 Rhizobium sp.
SP2∕0全细胞裂解液100μg100μg
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
香菇 Lentinula edodes
人退行性细胞英文名称:Calu-6
T24, 人膀胱细胞 Human
异常汉逊酵母异常变种 Hansenula anomala var. anomala
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum4-Chloropyridinium chloride    4-吡啶酸    7379-35-3
N-(3-CHLOROPROPYL)PIPERIDINE HYDROCHLORIDE    N-(3-丙基)啶酸    5472-49-1
2,6-Pyridinedicarboxylic acid    2,6-吡啶二酸    499-83-2
TRIDECANOYL CHLORIDE    十三酰化物    17746-06-4
VEGETABLE STEROL    植物固醇    
4-Methylbenzophenone    4-基二    134-84-9
Methyl L-argininate dihydrochloride    L-精氨酸酯二酸    26340-89-6
PICEATANNOL    白皮杉醇    10083-24-6
9-Fluorenylmethyl chloroformate    芴氧羰酰    28920-43-6
NA    丁香萝勒油    
4-ACETYL-4'-BROMOBIPHENYL    4-乙酰基-4-溴代联    5731/1/1
L-Fmoc-Aspartic acid alpha-tert-butyl ester    芴氧羰基-L-天冬氨酸-1-叔丁酯    129460-09-9
2-Hydroxybenzyl alcohol    水杨醇    1990/1/7
Phthalhydrazide    邻二酰肼    1445-69-8
1-(3-HYDROXYPROPYL)-2-PYRROLIDONE    N-羟丙基-2-吡咯烷    62012-15-1
[4-(1H-Imidazol-1-yl)phenyl]methanol    4-(1H-咪唑-1-基)醇    86718-08-3
N-Boc-N'-(2-chlorobenzyloxycarbonyl)-L-lysine    N-叔丁氧羰基-N'-(2-苄氧羰基)-L-赖氨酸    54613-99-9
Glutaric acid dimethyl ester    二酸二酯    1119-40-0
Diphenylcarbamyl chloride    二氨基酰    1983/1/2
Sodium 2-propylpentanoate    丙酸    1069-66-5
Eupalinolide B    野马追内酯B    877822-40-7
CYCLURON    环莠隆    2163-69-1
AMMONIUM TUNGSTATE 99.99%    钨酸铵    11140-77-5

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