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高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd说明书
产品简介:

高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd说明书售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

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更新时间:2017-01-23

厂商性质:经销商

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产品介绍

高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd说明书【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称 高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd说明书
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞系来源于一高背鲫鱼(滇池)的尾鳍组织。1985年由中国科学院昆明细胞库建立。 
培养条件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)   15%NBS
传代方法  1:2传代;7-10天一次
传代情况 P8
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 A类

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

马克斯克鲁维酵母 Kluyceromyces marxianus
Hepa 1-6(小鼠肝细胞)5×106cells/瓶×2
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
纯白链霉菌 Streptomyces candidus
大鼠神经小胶质细胞*培养基100mL
酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactis
苹果黑腐皮壳
小鼠畸胎瘤细胞英文名称:Pcc4
人气管平滑肌细胞*培养基100mL
嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
TSCCa(人舌鳞细胞)5×106cells/瓶×2
糖丁酸梭菌 Clostridium saccharobutyricum
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
IV型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mL
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小小链霉菌 Streptomyces parvullus
丹参酮IIA规格:1g/支;98%
热带假丝酵母 Candida tropicalis
毛木耳 Auricularia polytricha4,4'-Diamino-2,2'-stilbenedisulfonic acid    4,4'-二氨基二乙-2,2'-二磺酸    1981/11/8
N-(2,4-DINITROPHENYL)-L-ALANINE    N-(2,4-二基)-L-丙氨酸    1655-52-3
Tetramethyl-1,3-diaminopropane    四基丙    110-95-2
dibutyl 2,2'-thiobisacetate    硫代二甘酸二正丁酯    4121/12/4
2-Octanone    仲    111-13-7
(S)-N-Boc-(4-Pyridyl)alanine    Boc-3-(4-吡啶基)-L-丙氨酸    37535-57-2
6-Aminoindazole    6-氨基吲唑    6967-12-0
GALLIUM(III) TRIFLUOROMETHANESULFONATE    三磺镓    74974-60-0
Methyl 4-chloro-3-oxo-butanoate    4-乙酰乙酸酯    32807-28-6
Sanggenon C    桑根C    80651-76-9
4-Chloro-7-nitrobenzo-2-oxa-1,3-diazole    4--7-基-2,1,3-并氧杂恶二唑    10199-89-0
1,1'-Thiobisethane    乙硫    352-93-2
3-Ethynylthiophene    3-乙炔噻吩    67237-53-0
Calcium carbide    碳化钙    75-20-7
Glycitin    黄豆黄苷    40246-10-4
cis-3-Hexenyl formate    酸叶醇酯    33467-73-1
Phenol    酚    108-95-2
1,4-Dibromobutane    1,4-二溴丁烷    110-52-1

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