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产品型号:
更新时间:2017-02-09
厂商性质:经销商
访问量:320
021-39596320
dNTP 溶液 ,10mM5mL*使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
3. 电泳检测是否得到预计长度的 PCR 产物。
dNTP 溶液 ,10mM5mL*产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的*性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
产品介绍:
规格及成分:
pEcoli-6xHN-GFPuv(pEcoli6xHNGFPuv)(60908-2555)
pESC-URA(pESCURA)(60908-2754)y
pET-41a(+)(pET41a)(60908-2807)y
pET28-SBP-TEV(pET28SBPTEV)
pFA6a-3HA-TRP1(pFA6a3HATRP1)
pFL26
pGADT7-T (pGADT7T)(60908-3470)
pGEX-KG(pGEXKG)(60908-3850)
pGL4.42[luc2P HRE Hygro]
PhageScript藤黄微球菌 Micrococcus luteus
苜蓿中华根瘤菌
RBL-2H3(大鼠嗜碱性细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2gersion
屎肠球菌 Enterococcus faecium
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人脐静脉平滑肌细胞
MA, 小鼠星形胶质细胞 Mouse
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
侧耳 Pleurotus sp.
小鼠表皮角化细胞*培养基100mL
微白色放线菌转换变种 Actinomyces albidus
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
康宁木霉
人食管上皮细胞*培养基100mL
Ca Ski, 人宫颈细胞
phrGFP-1 (Vitality)(phrGFP1 )
pIEx-5(pIEx5)
pJ4omega
pK18mobSacB(60908-4395)
pLA7