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更新时间:2017-02-16
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离蛋白质的主要方法,但是单独配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。
2. 安全,将实验人员接触粉末状丙烯酰胺的可能降到zui低。
3. 灵活,分开提供的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺便于配制各种比例和浓度的 SDS-PAGE,满足分离各种大小不同的蛋白质的要求。
4. 使用改良的浓缩胶缓冲液,由于其含有染料,制备的浓缩胶呈蓝色,便于上样时识别加样孔。
5. 电泳后可直接用于考染、银染、Western 杂交等实验。
产品介绍:
1. *次使用本产品时需先配制30%丙烯酰胺溶液:在本产品提供的装有60 克丙烯酰胺干粉的塑料瓶中加入 146 mL 自备的去离子水,充分摇晃直到溶解即得 200 mL 30%丙烯酰胺溶液(用手大约摇 10-20 分钟)。
2. *次使用本产品时还需配制 30%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺(19:1)溶液(30% AB 溶液,下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙烯酰胺。对 SDS-PAGE 电泳,丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺比例一般在 19:1 左右,因为此时 PAGE 胶的孔径zui小,分辨率zui高。制备方法是将 3g 甲叉双丙烯酰胺干粉加入到 200 mL 上步配好的 30%丙烯酰胺溶液中(注意:甲叉双丙烯酰胺干粉有神经毒性,避免吸入粉末)。配好的 30%AB溶液 4℃避光保存并在1月内用完。
3. 根据平板的面积和胶的厚度估计需要配制的浓缩胶和分离胶的体积。并根据要分离的蛋白质的大小确定选择浓缩胶和分离胶的浓度.
4. 配制 10%的 APS(过硫酸铵):称 0.1 克过 APS 干粉到 1 mL 去离子水中,摇晃溶解。配制好的 10%的 APS 溶液可以在 4℃存放一周。
5. 配制分离胶:在一个 25 mL 的三角瓶中,先按下表的用量加入水、30% AB溶液和 4×分离胶缓冲液。以下是配制 10 mL 胶的用量,更大体积则各成分用量需按比例增加。丙烯酰胺溶液有神经毒性,一定要戴手套操作。
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