大鼠肌源性干细胞公司其它各种产品错配修复蛋白2抗体 弹性蛋白结合蛋白Fcn2抗体
褪黑素受体1A/松果体素受体1A抗体 胆汁酸盐输出泵/ATP结合盒转运蛋白11抗体
髓样分化蛋白抗体 胆汁酸受体抗体
粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗体 胆汁酸结合蛋白DDH2抗体
粘蛋白4抗体 胆盐激活脂肪酶抗体

冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

产品属性：

名称    大鼠肌源性干细胞
2.组织来源：肌肉组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

大鼠肌源性干细胞分离自肌肉组织；肌源性干细胞（MDSCs）属于成体多能干细胞，具有多细胞系分化和自我更新能力。通过诱导刺激，MDSCs可以分化为脂肪、骨骼、软骨、平滑肌和神经细胞等多种细胞和组织类型；作为基因治疗和组织工程的供体细胞，已成为治疗心肌梗死、Duchenne氏肌营养不良等疾病的研究热点；近年来，肌源性干细胞在治疗尿失禁等方面的应用逐步得到重视。需注意的是，肌源性干细胞主要存在于骨骼肌组织中，只是成熟组织的很少部分细胞；平时处于静止状态，在细胞应激和组织缺失时才会激活；并且随着年龄的增加，所含细胞数量逐渐减少，而目前临床疾病的治疗主要是针对成体进行。肌源性干细胞的体外扩增对细胞移植和干细胞介导的基因治疗至关重要。对肌源性干细胞的扩增研究发现，EGF、FGF-2和SCF可以通过减数分裂或促使不分裂细胞进入有丝分裂周期，从而刺激细胞增生。更重要的是，细胞因子诱导的体外扩增可以通过自我更新不刺激细胞分化，从而保持干细胞表型。

5.方法简介：

公司实验室分离的大鼠肌源性干细胞采用胶原酶-中性-联合消化法结合密度梯度离心、差速贴壁法，后通过肌源性干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

公司实验室分离的大鼠肌源性干细胞经Sca-1免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
热带假丝酵母   黄萎轮枝孢

海滨芽孢杆菌   粉红寄生菌

肺炎克雷伯菌冻干粉   短密青霉  fungusresistancetestingelectricalandelectronicequipment[11793]producesmycophenolicacid[59296]酶酚酸

费氏志贺氏菌   霉  产生霉毒素B1,B2,G1,G2.

解淀粉芽孢杆菌   恶臭假单胞菌
蛋白示踪上样缓冲液非还原，5× 5ml

SDS-PAGE电泳缓冲液10× 500ml

彩虹预染蛋白Marker10-170KD 250ul

彩虹预染蛋白Marker10-250KD 250ul

丽春红染色液 100ml
大鼠肌源性干细胞人免疫球蛋白D（IgD）elisa检测试剂盒

人免疫球蛋白E（IgE）elisa检测试剂盒

人免疫球蛋白G（IgG）elisa检测试剂盒

人免疫球蛋白G1（IgG1）elisa检测试剂盒

人免疫球蛋白G2（IgG2）elisa检测试剂盒
实验报告：
产品仅用于科研一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。