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更新时间:2022-04-13
厂商性质:经销商
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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠肠道干细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1160 |
名称 小鼠肠道干细胞
2.组织来源:肠组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
小鼠肠道干细胞分离自肠道组织;肠道指的是从胃幽门至的消化管。肠是消化管中长的一段,也是功能重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经排出体外。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内大的微生态系统。肠道干细胞(ISC)也称肠道上皮干细胞,主要位于肠黏膜隐窝内,其与肠道黏膜上皮的更新和修复密切相关。正常情况下,位于隐窝基底部的肠道干细胞不断向隐窝顶部(肠腔方向)迁移,整个迁移过程大约3-5d,在迁移过程中肠道干细胞分化形成不同的肠黏膜细胞。当受到外界生理或病理信号作用时,ISC可持续增殖、分化为成熟肠上皮细胞,如肠型细胞、杯状细胞、内分泌细胞和潘氏细胞等,从而维持肠道黏膜结构和功能的稳定性。
5.方法简介:
公司实验室分离的小鼠肠道干细胞采用-胶原酶联合消化后,用肠道干细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
6.质量检测:
公司实验室分离的小鼠肠道干细胞经MSI-1免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 球形
传代特性 可传2-3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
亲和层析柱1 mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5100mL
亲和层析柱3 mL RNase-free SDS 溶液 ,10%100mL
亲和层析柱6 mL RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%100mL
亲和层析柱12 mL RNase-free PVP K30 溶液 ,20%100mL
亲和层析柱30 mL RNase-free EDTA 溶液 ,0.5M,pH 8.0100mL
大鼠脂肪酸合成酶(FAS)elisa检测试剂盒
大鼠脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)elisa检测试剂盒
大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)elisa检测试剂盒
大鼠脂多糖/内毒素(LPS)elisa检测试剂盒
大鼠脂多糖(LPS)elisa检测试剂盒
小鼠肠道干细胞人胱硫醚β-合酶(CBS)elisa分析检测试剂盒
人胱天1(Casp-1)elisa分析检测试剂盒
人胱天10(CASP10)elisa分析检测试剂盒
人胱天12(Casp-12)elisa分析检测试剂盒
人胱天3(Casp-3)elisa分析检测试剂盒
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