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小鼠外周血中性粒细胞
产品简介:

小鼠外周血中性粒细胞公司其它各种产品皮屑样蛋白2抗体 耳聋-甲状腺肿综合征相关COBL蛋白抗体
相似肿瘤抑制基因HUGL抗体 耳聋常染色体显性遗传相关蛋白1抗体
低密度脂蛋白受体相关蛋白12抗体(抑制肿瘤蛋白7) 耳聋、常染色体隐性遗传22抗体
0酸化相似肿瘤抑制基因HUGL抗体 儿茶酚氧化酶PPO抗体
淋巴细胞活化基因-3抗体 儿茶酚O甲基移位酶抗体

产品型号:

更新时间:2025-06-10

厂商性质:经销商

访问量:434

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产品介绍

冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

图片13.jpg

产品属性:

产品名称

小鼠外周血中性粒细胞

规格

5×10Cells/T25培养瓶

货号

GOY-01X1146

名称    小鼠外周血中性粒细胞
2.组织来源:外周血

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

小鼠外周血中性粒细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。白细胞是一类无色、球形、有核的血细胞。白细胞不是一个均一的细胞群,根据其形态、功能和来源部位可以分为三大类:粒细胞、单核细胞和淋巴细胞,其中粒细胞又可根据胞质中颗粒的染色性质不同,分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞三种。中性粒细胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞质呈无色或极浅的淡红色,有许多弥散分布的细小的(0.20.4微米)浅红或浅紫色的*颗粒。细胞核呈杆状或25分叶状,叶与叶间有细丝相连。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。中性粒细胞来源于骨髓,具有分叶形或杆状的核,胞浆内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒。这些颗粒多是溶酶体,内含髓过氧化酶、、碱性磷酸酶和酸性水解酶等丰富的酶类,与细胞的吞噬和消化功能有关。中性粒细胞在血液的非特异性免疫中起着十分重要的作用,它处于机体抵御微生物病原体,特别是在化脓性细菌入侵的线,具有很强的吞噬活性,可吞噬细菌、衰老的红细胞、抗原一抗体复合物和坏死的细胞等。中性粒细胞内含有大量溶酶体酶,因此能将吞噬入细胞内的细菌和组织碎片*分解。当中性粒细胞吞噬数十个细菌后,自身发生解体,所释出的各种溶酶体酶类能溶解周围组织而形成脓液。中性粒细胞是人体内寿命短的细胞,一般体外培养12-24h内活性稳定,48h活性下降,96h基本死亡。

5.方法简介:

公司实验室分离的小鼠外周血中性粒细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

公司实验室分离的小鼠外周血中性粒细胞经瑞氏染色法,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基 FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 2-3天换液一次

生长特性 悬浮

细胞形态 圆形

传代特性 不增殖;不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相:空气,95%CO25%

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按 12 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1.
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm
离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3.
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
平盖灵芝(树舌)   0.5%葡萄糖肉汤100ml

异常汉逊酵母   泾阳链霉菌

甲型副伤寒沙门菌冻干粉   肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种

清酒乳杆菌清酒亚种   亚膜汉逊酵母

发酵纤维单胞菌   汉逊德巴利酵母
大鼠载脂蛋白B-48(ApoB48)elisa检测试剂盒

大鼠载脂蛋白B48(Apo B48)elisa检测试剂盒

大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)elisa检测试剂盒

大鼠载脂蛋白B100(Apo B100)elisa检测试剂盒

大鼠载脂蛋白A5(apo-A5)elisa检测试剂盒
小鼠外周血中性粒细胞人高密度脂蛋白(HDL)elisa分析检测试剂盒

人高密度脂蛋白1(HDL1)elisa分析检测试剂盒

人高密度脂蛋白2(HDL2)elisa分析检测试剂盒

人高密度脂蛋白3(HDL3)elisa分析检测试剂盒

人高密度脂蛋白(HDL-C)elisa分析检测试剂盒
实验报告:
产品仅用于科研一、分离与培养:
1
、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将成1mm3左右大小;
2
、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
3
、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
5
、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1
、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
2
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
5
PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37条件下放置1h
6
、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。


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