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H9c2 (2-1) (大鼠心肌细胞)
产品简介:

H9c2 (2-1) (大鼠心肌细胞)公司其它各种产品双皮层蛋白结构域蛋白DCDC2抗体 趋化因子CXCL15抗体
对接蛋白4抗体 趋化样因子受体1抗体
DULLARD蛋白抗体 趋化素样因子超家族成员8抗体
丝氨酸/蛋白激酶MNB抗体 趋化素样因子超家族成员7抗体
肝癌新基因3蛋白抗体 趋化素样因子超家族成员6抗体

产品型号:

更新时间:2022-04-06

厂商性质:经销商

访问量:227

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产品介绍

产品属性:

产品名称

H9c2 (2-1) (大鼠心肌细胞)

规格

1×10cells/T25培养瓶

货号

GOY-01X0089

名称    H9c2 (2-1) (大鼠心肌细胞) (种属鉴定正确)
别称 H9c2 (2-1); H9c2; H9C2

种属 大鼠

年龄(性别) 胚胎

组织来源 心脏,心肌层

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 成肌细胞样

背景描述 H9c2(2-1)细胞是一株由Kimes·BBrandt·BBD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆得到的细胞株;H9c2(2-1)细胞表现出许多骨骼肌的特性。H9c2(2-1)细胞中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰的刺激发生反应。如果培养基中的血清浓度下降到1%H9c2(2-1)细胞融合发生得很快。

生物安全等级 1

生长培养基 DMEM10% FBS1% P/S

推荐传代比例 1:2-1:4

推荐换液频率 2~3/

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37

受体表达情况 acetylcholine, expressed

基因表达情况 myokinase; creatine phosphokinase; myosin

保藏机构 ATCC; CRL-1446 BCRC; 60096 BCRJ; 0098 ECACC; 88092904

图片2.jpg

冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按 12 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1.
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm
离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3.
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
实验报告:
产品仅用于科研一、分离与培养:
1
、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
2
、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
3
、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
5
、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1
、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
2
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
5
PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37条件下放置1h
6
、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
非冻型细菌 RNA 保存液250mL  Lectin 基因植物 PCR Mix100

非冻型拭子病毒保存液100mL  ESPES-NOs 基因植物 PCR Mix100

病毒沉淀剂100mL  ESPES 基因植物 PCR Mix100

水样病毒沉淀剂10   专用离心管 ( 配研磨杵用 ) 50

动物 RNAout(TRIzol) 100mL  专用离心管 ( 配研磨杵用 ) 1000
大鼠苯酚磺基转移酶(PST)elisa检测试剂盒

大鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)elisa检测试剂盒

大鼠胞外5'-核苷酸酶(NT5E)elisa检测试剂盒

大鼠半乳糖凝集素9(GAL9)elisa检测试剂盒

大鼠半乳糖凝集素7(GAL7)elisa检测试剂盒
H9c2 (2-1) (
大鼠心肌细胞)防脱载玻片经APES处理 50

防脱载玻片经多聚赖氨酸处理 50

飞燕草素-O-半乳糖苷含量测试盒

飞燕草素-O-葡萄糖苷含量测试盒

非变性蛋白裂解抽提液100ml


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