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BNL 1ME A.7R.1 (小鼠肝上皮细胞)
产品简介:

BNL 1ME A.7R.1 (小鼠肝上皮细胞)公司其它各种产品4号染色体开放阅读框19抗体 糖基转移酶GLT8D2抗体
4号染色体开放阅读框27抗体 糖基转移酶8结构域1抗体
4号染色体开放阅读框22抗体 糖基转移酶6结构1抗体
4号染色体开放阅读框14抗体 糖基转移酶28家族1抗体
0酸化C端结合蛋白1抗体 糖基转移酶25结构域2/前胶原半乳糖基转移酶2

产品型号:

更新时间:2022-04-06

厂商性质:经销商

访问量:159

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产品介绍

冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

图片13.jpg

产品属性:

产品名称

BNL 1ME A.7R.1 (小鼠肝上皮细胞)

规格

1×10cells/T25培养瓶

货号

GOY-01X0321

名称    BNL 1ME A.7R.1 (小鼠肝上皮细胞)
别称 BNL.1ME A.7R.1; BNL 1MEA.7R.1; BNL-HCC

年龄(性别) 胚胎

组织来源 肝脏

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 BNL 1ME A.7R.1细胞由正常肝上皮细胞BNL CL.2经甲基胆蒽诱导转化而建立;BNL 1ME A.7R.1细胞在0.3%的琼脂中可生长,鼠痘病毒阴性。

生物安全等级 1

生长培养基 DMEM10% FBS1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3/

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37

致瘤性 Yes, forms tumors in BALB/c mice and ATxFL mice.

保藏机构 ATCC; TIB-75

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按 12 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1.
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm
离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3.
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
大豆根瘤菌   过渡原囊菌

双重轮丝链霉菌   厚孢根霉

胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基60mm用于普通表面或醇类与酚类消毒剂的物表   蚀脉镰孢霉

雅致放射毛霉=葡匐放射毛霉   多形鲁氏酵母

德氏乳杆菌乳酸亚种(莱氏曼氏乳杆菌)   粘质沙雷氏菌
大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PCP)elisa检测试剂盒

大鼠Ⅲ型前胶原(HPC)elisa检测试剂盒

大鼠Ⅲ型胶原(Col )elisa检测试剂盒

大鼠Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-)elisa检测试剂盒

大鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-)elisa检测试剂盒
BNL 1ME A.7R.1 (
小鼠肝上皮细胞)大鼠唾液酸酶2(SIAL2)elisa检测试剂盒

大鼠蛙皮素,雨蛙肽elisa检测试剂盒

大鼠外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)elisa检测试剂盒

大鼠晚期糖基化端产物特异受体(AGER)elisa检测试剂盒

大鼠晚期糖基化终末产物(AGE)elisa检测试剂盒
实验报告:
产品仅用于科研一、分离与培养:
1
、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
2
、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
3
、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
5
、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1
、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
2
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
5
PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37条件下放置1h
6
、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。


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