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更新时间:2022-04-02
厂商性质:经销商
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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
产品名称 | 规格 | 货号 |
DLD-1 (结直肠腺癌上皮细胞) | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | GOY-01X0074 |
名称 DLD-1 (结直肠腺癌上皮细胞) (STR鉴定正确)
别称 DLD 1; DLD1; CoCL3
种属 人类
年龄(性别) 成人
组织来源 结直肠腺癌上皮细胞
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
背景描述 DLD-1细胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。在ATCC和其它地方进行的DNA指纹鉴定和染色体组型分析表明DLD-1细胞与HCT-15细胞相似,说明这两者是来自同一个人的不同克隆。DLD-1细胞和HCT-15细胞的遗传起源可通过DNA指纹鉴定证实,但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记一致改变或数目上一致改变。DLD-1细胞的CSAp阴性(CSAp-),p53抗原表达呈阳性(p53抗原产生了一个C→T点突变导致241位的Ser→Phe)。DLD-1细胞角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性,癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性,癌基因N-myc的表达未做检测。DLD-1细胞表达肿瘤特异性核基质蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1细胞代数不明且污染了支原体,其后经过12周多种抗生素联合培养处理,处理之后每周用Hoechst染色和标准培养法检测。其后连续11个月不加抗生素培养,DLD-1细胞所有的检测呈阴性。
生物安全等级 1
生长培养基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~24-48小时
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).
抗原表达情况 Blood Type O. The cells are weakly positive for keratins and vimentin. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression (the p53 antigen produced has a C -> T mutation re
基因表达情况 carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3.
保藏机构 ATCC; CCL-221 BCRC; 60132 DSMZ; ACC-278 ECACC; 90102540
使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
4mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个 绿如蓝核酸染料 (UV)0.5mL
4mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)1个 绿如蓝蛋白染液250 次
4mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)1个 绿如兰核酸染料 ( 可见光型 )10mL
4mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD)1个 卵巢上皮细胞生长因子5mL
4mL DNA 离心超滤管 (300-500 KD)1个 卵白蛋白标准品,2mg/mL1mL
大鼠免疫球蛋白M(IgM)elisa检测试剂盒
大鼠免疫球蛋白G(IgG)elisa检测试剂盒
大鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa检测试剂盒
大鼠免疫球蛋白A(IgA)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠络氨酸酶(TYR)elisa检测试剂盒
DLD-1 (结直肠腺癌上皮细胞)α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)测试盒
α-L-岩藻糖苷酶AFU试剂盒 R:50ml×2 速率法
α-半乳糖苷酶(α-GAL)测试盒
α-AMS测试盒 100管/96样 淀粉-碘比色法
α-测试盒
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